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1.1特殊的教學(xué)對(duì)象
1)目前多數(shù)學(xué)生是獨(dú)生子女,自我為中心的意識(shí)很強(qiáng),他們渴望成功卻又缺乏吃苦耐勞的精神,心里想學(xué)習(xí)卻又不具備自我約束的能力;2)基礎(chǔ)課程的上課方式多為同專業(yè)、甚至是不同專業(yè)的多個(gè)班級(jí)的合班課,學(xué)生人數(shù)較多,化學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)層次不齊,任課教師在課堂上很難做到照顧每一個(gè)學(xué)生的學(xué)習(xí)情況,再加上學(xué)時(shí)數(shù)的壓縮,學(xué)生的學(xué)習(xí)效果直接面臨一些困惑和難題:聽(tīng)課效果不好、抄作業(yè)現(xiàn)象常有發(fā)生、考試結(jié)果不盡如人意、無(wú)法與后續(xù)專業(yè)課程銜接等等;3)非化學(xué)專業(yè)學(xué)生對(duì)化學(xué)基礎(chǔ)課的學(xué)習(xí)較被動(dòng),創(chuàng)新的主動(dòng)性與積極性不強(qiáng)[3].以某高校園藝專業(yè)為例,在大一學(xué)年的第二學(xué)期,“分析化學(xué)”課程往往與英語(yǔ)及一些專業(yè)課程同時(shí)開(kāi)課,相比而言,分析化學(xué)知識(shí)零碎,各類公式多,且抽象、難以理解,學(xué)生學(xué)習(xí)起來(lái)有枯燥無(wú)味之感,普遍反應(yīng)記不住,因而缺乏興趣,積極主動(dòng)性不高,甚至出現(xiàn)畏懼心理;同時(shí)“重專業(yè)知識(shí),輕基礎(chǔ)知識(shí)”的現(xiàn)象也普遍存在.因此如何激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)基礎(chǔ)課的興趣與主動(dòng)性,最大程度地發(fā)揮他們的潛能,是擺在大學(xué)基礎(chǔ)課教師面前的一個(gè)新課題.
1.2繁雜的課程內(nèi)容
“分析化學(xué)”學(xué)科在整個(gè)學(xué)習(xí)階段起著承上啟下的作用.它由一系列分析方法所構(gòu)成,主要包括化學(xué)分析法和儀器分析法,經(jīng)典的化學(xué)分析法又可分為重量分析法和滴定分析法;儀器分析法主要有光學(xué)分析法、電化學(xué)分析法、色譜分析法等等,其中每一種分析方法因響應(yīng)信號(hào)機(jī)制不同還可進(jìn)一步細(xì)分.不同的分析方法具有不同的原理、條件、儀器、特點(diǎn)和適用范圍等,既相互聯(lián)系又各自成體系,涉及的知識(shí)很廣,并且還在以日新月異的速度向前發(fā)展,各種新理論、新方法和新技術(shù)層出不窮.因此在這樣的大背景下,如何在“分析化學(xué)”學(xué)科的教學(xué)中營(yíng)造一種活躍思維、主動(dòng)學(xué)習(xí)、充分體現(xiàn)學(xué)生主體地位的氛圍,真正地提高課堂的教學(xué)效率,是每一位承擔(dān)這門(mén)課程的教師值得思考和探討的問(wèn)題.
1.3機(jī)械的實(shí)驗(yàn)教學(xué)
在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面,簡(jiǎn)單的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)多,綜合設(shè)計(jì)的研究性實(shí)驗(yàn)較少[4],實(shí)驗(yàn)內(nèi)容不能及時(shí)反映分析化學(xué)的發(fā)展現(xiàn)狀與相關(guān)學(xué)科間的滲透交叉,并且多數(shù)實(shí)驗(yàn)都是在教師的“精心安排”下進(jìn)行“照方抓藥”,學(xué)生只需按部就班地跟著教材走就能完成實(shí)驗(yàn),獨(dú)立思考的機(jī)會(huì)不多,嚴(yán)重缺乏在方案設(shè)計(jì)、樣品前處理及數(shù)據(jù)處理等方面的創(chuàng)造性鍛煉.在實(shí)驗(yàn)授課方面,多數(shù)實(shí)驗(yàn)課程仍采用傳統(tǒng)的“教師先講解原理———學(xué)生接受,然后動(dòng)手實(shí)驗(yàn)”的模式.教師“傾囊相授”,希望將所有的知識(shí)點(diǎn)都傳授于學(xué)生,但與教師的教學(xué)熱情相反,學(xué)生的積極性卻往往不高,無(wú)動(dòng)于衷,對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的理解與設(shè)計(jì)基本依賴于教師的講解,缺乏對(duì)未知知識(shí)的探求精神以及獨(dú)立進(jìn)行實(shí)踐操作的能力.在實(shí)驗(yàn)操作方面,對(duì)于移液、稱量等基本操作,雖然教師已詳細(xì)講解并演示,學(xué)生操作仍不規(guī)范,如在減量法稱量時(shí)直接用手接觸稱量瓶,未用紙條和紙片;滴定時(shí)不注意觀察標(biāo)準(zhǔn)溶液滴落點(diǎn)周圍的顏色變化,卻不時(shí)地抬頭觀察滴定管的讀數(shù);未進(jìn)行半滴操作等.還有一些儀器較為精密、貴重,數(shù)量偏少,不能保證每個(gè)學(xué)生都能掌握所有實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié),再加上操作步驟較多,一些學(xué)生怕操作不當(dāng)?shù)貌坏嚼硐氲臄?shù)據(jù),只簡(jiǎn)單做一些輔助的配合工作,甚至站在旁邊“冷眼觀看”,基本上是學(xué)無(wú)所獲.綜上所述,不難看出,目前“分析化學(xué)”實(shí)驗(yàn)教學(xué)相對(duì)比較機(jī)械.所以,如何建立新型的分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程體系,采用新穎的教學(xué)方法,賦予學(xué)生更廣闊、更自主的學(xué)習(xí)空間,使學(xué)生在知識(shí)和能力上獲得雙豐收,是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn).
1.4單一的評(píng)價(jià)方式
多年來(lái),“分析化學(xué)”課程的考核方式為期末閉卷考試這種單一的考核形式,課程最終成績(jī)?yōu)槠谀┛荚嚨木砻娉煽?jī)、實(shí)驗(yàn)成績(jī)和平時(shí)成績(jī)加權(quán)后的總評(píng)成績(jī).成績(jī)高的學(xué)生可能是“臨時(shí)抱佛腳”即考前幾天突擊復(fù)習(xí)的結(jié)果.這種考核方式雖然能較好地考察學(xué)生對(duì)“分析化學(xué)”課程基礎(chǔ)知識(shí)的儲(chǔ)備情況,卻不能很好地反映出他們綜合分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力.因此,要使學(xué)生的創(chuàng)新能力、綜合運(yùn)用知識(shí)能力得到真正的提高,必須要建立一套科學(xué)的評(píng)價(jià)方式.
2“分析化學(xué)”課程教學(xué)改革的主要措施
2.1激發(fā)學(xué)生興趣
美國(guó)教育家杜威指出:教育不是一件“告訴”和“被告訴”的事情,而是一個(gè)主動(dòng)建設(shè)的過(guò)程.因此,在教學(xué)過(guò)程中應(yīng)充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性,激發(fā)他們的學(xué)習(xí)興趣.為此,可采取在傳統(tǒng)授課方式的基礎(chǔ)上,增加圖片、動(dòng)畫(huà)效果、視頻等多樣化的多媒體內(nèi)容幫助學(xué)生理解晦澀難懂的理論內(nèi)容,并注重與相關(guān)學(xué)科之間的銜接與聯(lián)系,適時(shí)地把一些化學(xué)史、應(yīng)用實(shí)例或社會(huì)熱點(diǎn)問(wèn)題引入課堂,使學(xué)生認(rèn)識(shí)到理論源于實(shí)踐,又能指導(dǎo)實(shí)踐.對(duì)于食品類專業(yè)的學(xué)生,在講解色譜分析法時(shí),可介紹2008年我國(guó)發(fā)生的非法添加三聚氰胺的毒奶粉事件,進(jìn)而向?qū)W生提出可用高效液相色譜法測(cè)定飼料和植物蛋白粉中的三聚氰胺,此外還可介紹引起社會(huì)廣泛關(guān)注的二噁英、蘇丹紅、瘦肉精等食品安全事件及奧運(yùn)會(huì)期間興奮劑的檢測(cè);針對(duì)生物學(xué)專業(yè)的學(xué)生,在介紹緒論“分析化學(xué)”課程的重要性及應(yīng)用性時(shí),如果只是泛泛地說(shuō)分析化學(xué)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著非常重要的作用,學(xué)生其實(shí)并沒(méi)有深刻的體會(huì),這時(shí)可列舉在生物大分子研究領(lǐng)域做出重大貢獻(xiàn)而獲得2002年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的三位分析化學(xué)家約翰•芬恩、田中耕一和庫(kù)爾特•維特里希,緊接著介紹分析化學(xué)在他們熟知的領(lǐng)域,如基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)中發(fā)揮的重要作用.這種講授方法不但會(huì)使學(xué)生進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到“分析化學(xué)”課程在其所學(xué)專業(yè)的重要地位和作用,而且還能開(kāi)拓他們的視野,最大程度地激發(fā)他們的求知欲和創(chuàng)新性,進(jìn)而參與到分析化學(xué)的科研工作中來(lái).另一方面,還應(yīng)在現(xiàn)代教學(xué)理論的指導(dǎo)下,以“教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體,并凸顯主體”為研究突破口,發(fā)揮學(xué)生主觀能動(dòng)性,把教師的“教”和學(xué)生的“學(xué)”統(tǒng)一起來(lái),探索以學(xué)生為主體的教學(xué)模式,改變現(xiàn)在普遍存在的學(xué)生學(xué)得枯燥,教師教得艱難,大家都感到無(wú)所適從的局面,以達(dá)到在教學(xué)過(guò)程中,學(xué)生真正成為學(xué)習(xí)的主人,“快樂(lè)學(xué)習(xí)”、“學(xué)會(huì)學(xué)習(xí)”,最終達(dá)到提高人才培養(yǎng)質(zhì)量的目標(biāo).例如,在教學(xué)實(shí)踐中可采取學(xué)生參與的方式,先由教師提出分析任務(wù),如水環(huán)境中As含量的測(cè)定、重要藥物溶菌酶的測(cè)定[5]等,學(xué)生依據(jù)興趣自由分組,先完成綜述小論文,再由教師指導(dǎo)討論各種分析方法的優(yōu)缺點(diǎn).這樣,學(xué)生先是對(duì)這些分析任務(wù)產(chǎn)生濃厚興趣,水環(huán)境中As的含量究竟是多少?國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)允許的含量是多少?經(jīng)常飲用超標(biāo)水,會(huì)對(duì)當(dāng)?shù)厝恕⑿螽a(chǎn)生怎樣的不良后果?在此基礎(chǔ)上,深刻認(rèn)識(shí)到準(zhǔn)確測(cè)定的重要性.通過(guò)查閱文獻(xiàn)資料,了解到As的測(cè)定方法有滴定分析法、原子吸收光度法、電分析方法及紫外-可見(jiàn)吸收光譜法等,最后根據(jù)環(huán)境水樣中As的含量范圍及實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的儀器資源,確定選用紫外-可見(jiàn)分光光度法.在此過(guò)程中,學(xué)生可將課堂中學(xué)到的分析方法的評(píng)價(jià)指標(biāo)及各種分析方法的原理用于解決實(shí)際問(wèn)題,逐步形成為達(dá)到分析目的而應(yīng)采取的分析化學(xué)專業(yè)思維的方式和方法.
2.2優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容
“分析化學(xué)”課程教材難度大、內(nèi)容多、學(xué)時(shí)少,因此,教學(xué)改革首先要以優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容為核心,重點(diǎn)突出專業(yè)性和實(shí)用性:
1)對(duì)課程內(nèi)容進(jìn)一步優(yōu)化和精簡(jiǎn),壓縮同其他基礎(chǔ)課程中相同或相近的內(nèi)容,如氫離子濃度的計(jì)算等,這些在普通化學(xué)部分章節(jié)已經(jīng)提到,可略講甚至不講,讓學(xué)生自己去復(fù)習(xí).
2)對(duì)于相似的知識(shí)點(diǎn),應(yīng)培養(yǎng)學(xué)生歸納、比較和觸類旁通的能力.在滴定分析法中,可精講酸堿滴定法,包括滴定分析法的共性(基本原理、滴定曲線、突躍范圍及影響因素、指示劑、終點(diǎn)誤差和應(yīng)用等),然后通過(guò)對(duì)比和歸納手段,講解配位滴定法和氧化還原滴定法;在講授紫外-可見(jiàn)分光光度法時(shí),可以給學(xué)生列舉蛋白質(zhì)含量測(cè)定的光度方法,如考馬斯亮藍(lán)染色法、雙縮脲法(Biuret法),并將這些方法和之前學(xué)習(xí)的凱式定氮法相比較,使學(xué)生了解各種方法的優(yōu)缺點(diǎn).通過(guò)這樣前后知識(shí)的貫通融合,達(dá)到了以點(diǎn)帶面、以小見(jiàn)大、觸類旁通的作用,不但大大節(jié)約了課時(shí),也培養(yǎng)了學(xué)生自主學(xué)習(xí)的能力.
3)對(duì)于儀器分析內(nèi)容,應(yīng)把握教學(xué)重點(diǎn),理清知識(shí)主線,突出方法間的聯(lián)系與區(qū)別[6].儀器分析的主要內(nèi)容實(shí)際上就是響應(yīng)信號(hào)與被測(cè)物性質(zhì)(與結(jié)構(gòu)有關(guān))、濃度之間的關(guān)系,教師應(yīng)讓學(xué)生徹底理解并掌握“利用峰位置可進(jìn)行定性分析,峰高或峰面積可進(jìn)行定量分析”這一基本規(guī)律.在三大類分析中(包括光譜分析、電分析和色譜分析),利用各自的峰位置可推斷被測(cè)物的結(jié)構(gòu)信息,而峰面積或峰高則可以反映被測(cè)物的含量或濃度信息.這種講授方法會(huì)使學(xué)生對(duì)儀器分析知識(shí)有一整體性的認(rèn)識(shí),在此基礎(chǔ)上再對(duì)不同方法進(jìn)行比較.這樣不僅可以收到較好的教學(xué)效果,還能幫助學(xué)生掌握學(xué)習(xí)知識(shí)的方法,最終達(dá)到雙贏的目的.
4)將學(xué)科的前沿發(fā)展動(dòng)態(tài)引入課堂教學(xué).徐光憲院士指出,應(yīng)把21世紀(jì)分析化學(xué)生龍活虎、立體多維的形象展示給學(xué)生,引起學(xué)生對(duì)該課程的極大興趣.因此在實(shí)際教學(xué)中,應(yīng)結(jié)合課程進(jìn)度,適度地把學(xué)科最前沿的知識(shí)和最新的研究動(dòng)態(tài)介紹給學(xué)生,注重知識(shí)面的補(bǔ)充和延伸.例如,在講解分光光度法時(shí),可引進(jìn)現(xiàn)今發(fā)展最為迅速的碳納米材料.碳材料的基本組成元素雖然相同,但由于這些元素的空間排布不同繼而可形成不同的形態(tài),有零維的碳點(diǎn)、一維的碳納米管、二維的石墨烯等,不同的碳材料在紫外-可見(jiàn)光區(qū)域有不同的吸收峰,根據(jù)吸收峰(尤其是最大吸收波長(zhǎng))的位置可進(jìn)行定性分析,區(qū)分不同的碳材料,根據(jù)吸光度的大小可進(jìn)行定量分析,確定碳材料的濃度或含量.同時(shí)可利用透射電鏡、原子力顯微鏡等進(jìn)一步確定碳材料內(nèi)部的精確結(jié)構(gòu),用共聚焦顯微成像儀可觀察其在細(xì)胞內(nèi)的成像情況,為將其進(jìn)一步應(yīng)用在重大疾病的診斷和治療方面提供理論依據(jù).另外,對(duì)于現(xiàn)代分析化學(xué)中單細(xì)胞實(shí)時(shí)分析、單分子檢測(cè)等前沿技術(shù),可以專題的形式介紹給學(xué)生.最后,還可以讓學(xué)生通過(guò)圖書(shū)館的網(wǎng)絡(luò)資源(如中文的CNKI和英文的WebofScience)追蹤相關(guān)領(lǐng)域的最新動(dòng)態(tài),這樣不僅為課堂注入了新鮮血液,而且能激發(fā)學(xué)生探索科學(xué)的興趣,有利于創(chuàng)新能力的培養(yǎng).
2.3強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)
“分析化學(xué)”是一門(mén)以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的學(xué)科,實(shí)驗(yàn)教學(xué)起著課堂教學(xué)不可替代的特殊作用,它不僅能使學(xué)生驗(yàn)證和鞏固理論知識(shí),而且能培養(yǎng)學(xué)生觀察、分析和解決問(wèn)題的能力,養(yǎng)成嚴(yán)謹(jǐn)、細(xì)致、實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度.因此,如何使學(xué)生的實(shí)驗(yàn)效率最大化,用“心”體會(huì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,一直是“分析化學(xué)”教育工作者長(zhǎng)期以來(lái)不斷追求的目標(biāo).最近幾年,有關(guān)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革如火如荼,筆者所在的學(xué)校也積極響應(yīng)號(hào)召,針對(duì)“分析化學(xué)”實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行改革.
1)在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的安排上,保留具有代表性的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),通過(guò)這些實(shí)驗(yàn)的練習(xí),使學(xué)生規(guī)范地掌握基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的分析方法和操作要領(lǐng).除此之外,增加一些與實(shí)際生活有緊密聯(lián)系的綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),內(nèi)容的選擇注重各專業(yè)的通用性,如食醋中總酸度的測(cè)定、日用衛(wèi)生紙中熒光增白劑的檢測(cè),并讓學(xué)生自行提供樣品.這些實(shí)驗(yàn)很好地鍛煉了學(xué)生在文獻(xiàn)檢索、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)、樣品前處理、儀器操作及用計(jì)算機(jī)軟件處理數(shù)據(jù)等方面的能力,大大地提高了學(xué)生的參與感和成就感,全方位地培養(yǎng)學(xué)生的化學(xué)素養(yǎng).
2)在實(shí)驗(yàn)講授和學(xué)生的操作訓(xùn)練方面,摒棄教師“一切包辦”的理念和“老師講,學(xué)生聽(tīng)”的單一模式.對(duì)于分析天平、滴定管等常規(guī)儀器,在課前預(yù)習(xí)的基礎(chǔ)上,教師對(duì)每一項(xiàng)基本操作技能(包括操作規(guī)范、操作要點(diǎn)和技巧、注意事項(xiàng)及影響實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素等)邊講邊示范,讓學(xué)生先在感官上對(duì)基本操作技能有初步的印象,然后再通過(guò)大量的獨(dú)立操作練習(xí)得以強(qiáng)化;對(duì)于一些涉及到精密貴重儀器的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,可采用“虛擬實(shí)驗(yàn)”的方式,通過(guò)圖片、視頻等多媒體仿真動(dòng)畫(huà)教學(xué),將儀器工作原理和實(shí)驗(yàn)過(guò)程通過(guò)三維虛擬動(dòng)畫(huà)的模式直觀展現(xiàn)出來(lái),教師要適時(shí)地對(duì)操作中可能出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行講解與引導(dǎo),盡可能提示操作可能出錯(cuò)的地方以及出錯(cuò)所導(dǎo)致的不良結(jié)果,增強(qiáng)學(xué)生的感性認(rèn)識(shí),減少實(shí)驗(yàn)中由于操作不當(dāng)?shù)仍斐傻牟槐匾膿p失和浪費(fèi).
2.4科學(xué)評(píng)價(jià)學(xué)生成績(jī)
要培養(yǎng)適應(yīng)社會(huì)發(fā)展需要的多元化創(chuàng)新人才,必須要有科學(xué)的評(píng)價(jià)方式.基于此,要改變以“考試分?jǐn)?shù)論英雄”的做法,強(qiáng)化對(duì)學(xué)習(xí)過(guò)程、學(xué)習(xí)能力的評(píng)價(jià),構(gòu)建多元評(píng)價(jià)體系.筆者在授課過(guò)程中均采用結(jié)構(gòu)評(píng)分來(lái)組成課程的總成績(jī),即總成績(jī)=平時(shí)成績(jī)(10%)+實(shí)驗(yàn)成績(jī)(30%)+期末考試成績(jī)(60%)綜合考察學(xué)生學(xué)習(xí)情況,其中平時(shí)成績(jī)改變以往所用的點(diǎn)名或簽到次數(shù)計(jì)算的方式,而是通過(guò)對(duì)學(xué)生在課前預(yù)習(xí)、隨堂練習(xí)、課堂討論及課后復(fù)習(xí)的總體表現(xiàn)來(lái)確定;實(shí)驗(yàn)成績(jī)采用綜合評(píng)定標(biāo)準(zhǔn),包括預(yù)習(xí)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、紀(jì)律清潔四部分,學(xué)生編造實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果的不良風(fēng)氣得以糾正.實(shí)踐證明,這種成績(jī)?cè)u(píng)定方式有利于調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性,激發(fā)其學(xué)習(xí)熱情,真實(shí)地反映了學(xué)生對(duì)“分析化學(xué)”課程“三基”知識(shí)的掌握情況,最終達(dá)到提高教學(xué)質(zhì)量的目的.
3結(jié)語(yǔ)
堿基的組成和排列順序不同是DNA核苷酸之間存在差別的主要原因,因此,研究DNA分子中堿基的電化學(xué)性質(zhì)也具有十分重要的意義。本文僅對(duì)DNA鏈中的堿基在單壁碳納米管復(fù)合聚吖啶橙(SWNTs/POAO)電極上的電化學(xué)行為進(jìn)行研究。
(一)堿基對(duì)的氧化現(xiàn)象SWNTs/POAO電極既具有較大的比表面積大的π電子體系及大量的活性電位特點(diǎn),又具有導(dǎo)電聚合物地性能。因此,在SWNTs/POAO電極上,嘌呤堿基和嘧啶堿基的氧化電位都隨著其結(jié)構(gòu)環(huán)系上的取代基增多而產(chǎn)生反向移動(dòng),且氧化的峰電流會(huì)隨著濃度增加而出現(xiàn)線性增長(zhǎng)。由于嘌呤堿基是由嘧啶和咪唑酬和而成的環(huán)系,多π芳雜環(huán)系和缺π芳雜環(huán)系都在其結(jié)構(gòu)中存在,所以鳥(niǎo)嘌呤(GUA)和腺嘌呤(ADE)容易發(fā)生氧化,且氧化電流較大;而嘧啶堿基結(jié)構(gòu)中只有缺π芳雜環(huán),致使其比嘌呤堿基的氧化電位較正,氧化電流較小。由上所述,可以得出嘧啶堿基電氧化反應(yīng)的靈敏度比嘌呤堿基低的結(jié)論。
(二)嘌呤堿基氧化過(guò)程分析以ADE和GUA為研究對(duì)象,分別分析研究了其在不同電極的反應(yīng)(見(jiàn)圖2)。在圖中可以發(fā)現(xiàn),只有嘌呤堿基對(duì)的氧化電流峰,而沒(méi)有還原峰,由此可以得知嘌呤堿基的電極反應(yīng)是不可逆的過(guò)程。在圖中還可以看出,ADE和GUA的氧化峰電流在GCE(玻碳電極)和POAO(聚吖啶橙電極)上基本相同且都較小;而在SWNTs修屎電極上比在GCE上有明顯增加,這表明碳單壁納米管增加了GCE電極的有效面積,且其自身帶有的—COOH、—OH基團(tuán)給電極提供了更多的反應(yīng)點(diǎn),催化了GUA、ADE的反應(yīng),峰電流明顯增大。而在SWNTs/POAO電極上,嘌呤堿基的氧化電流增加更加明顯。
二、DNA堿基與金屬離子的相互作用
脫氧核糖核酸與金屬離子的相互作用,主要有其對(duì)金屬離子的吸附作用以及核糖核酸上特點(diǎn)結(jié)合點(diǎn)與金屬離子發(fā)生配位作用。本文僅對(duì)DNA嘧啶堿基與汞、銀離子的相互作用進(jìn)行分析。
(一)汞離子與胸腺嘧啶的相互作用汞離子與DNA的相互作用在1952年時(shí)就已經(jīng)被Katz發(fā)現(xiàn),但其觀點(diǎn)是汞離子與DNA鏈中的磷酸骨架發(fā)生了互相作用,到后來(lái)Thomas用紫外光譜證實(shí)汞離子是與DNA中的堿基發(fā)生作用。在這個(gè)發(fā)現(xiàn)之后,Katz于1963年又提出了T-Hg-T的假設(shè),這個(gè)假設(shè)內(nèi)容是汞離子與T堿基是以1:2的比例形成新配合物。近年來(lái),日本人Ono等人通過(guò)溶解曲線、質(zhì)譜以及核磁共振等手段進(jìn)一步證實(shí)了T-Hg-T的假設(shè)[2]。由于有毒性是汞離子的具備的特點(diǎn),利用DNA能夠與汞離子結(jié)合發(fā)生反應(yīng)的特性,可以來(lái)進(jìn)行環(huán)境汞離子含量的檢測(cè)。
(二)核糖核酸與胞嘧啶的相互作用銀離子與胞嘧啶的相互作用是在2002年才由Tanaka小組開(kāi)始研究,他們通過(guò)研究銀離子與人工合成DNA雙鏈(含有嘧啶(Pyridine)修飾堿基形成的P-P錯(cuò)配)發(fā)生特異性結(jié)合的現(xiàn)象,證實(shí)了銀離子與嘧啶反應(yīng)能夠形成穩(wěn)定的P-Ag-P結(jié)構(gòu)。2008年,One小組提出了銀離子可以與胞嘧啶形成穩(wěn)定的C-Ag-C結(jié)構(gòu),并通過(guò)變溫紫外的研究手段證實(shí)了銀離子具有能夠使錯(cuò)配的DNA雙鏈更加穩(wěn)定。根據(jù)銀離子的這種特性,可以將其設(shè)計(jì)成分子信標(biāo),應(yīng)用在醫(yī)學(xué)診斷、生物工程研究等各個(gè)領(lǐng)域。
三、結(jié)語(yǔ)
BrukerAV-300,AV-500型核磁共振光譜儀;X4型數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀(溫度未校正);Agilent1100LC/MSDSL;LABCONCO冷凍干燥儀;JASCOP-1020旋光測(cè)定儀半制備型高效液相色譜儀Waters600型;檢測(cè)器Waters2487紫外雙波長(zhǎng)檢測(cè)器;Agilent-1100高效液相色譜儀;柱色譜材料為硅膠(200-300目)、RP-C18(YMC;12nm)及SephadexLH-20(AmershamBiosciences);柱色譜試劑均為分析純,高效液相色譜試劑均為色譜純。
白芷根于200403采自江蘇省鹽城市洋馬鎮(zhèn),經(jīng)江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所袁昌齊研究員鑒定,憑證標(biāo)本現(xiàn)存放于江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所標(biāo)本館內(nèi)。
2提取與分離
白芷根(38kg)用95%的乙醇提取3次,合并提取液,減壓濃縮至無(wú)醇味。提取液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取,剩余部分為水部分。將水部分上樣于D101大孔樹(shù)脂柱,水-乙醇梯度洗脫,分為6個(gè)部分。其中50%洗脫部分分別進(jìn)行硅膠柱層析,氯仿-甲醇(10∶1~7∶3)梯度洗脫,各流分采用薄層或高效液相檢識(shí),合并相類似組分,反復(fù)反相柱層析分離,凝膠純化,得到6個(gè)化合物。
3結(jié)構(gòu)鑒定
3.1化合物1
白色無(wú)定形粉末(凍干),mp170~172℃,[α]21.7D=-52.40(c=0.065甲醇:水=40:60),紫外燈365,254nm下均顯示藍(lán)綠色熒光。ESI-MSm/z:509[M+Na]+,示其分子量為486,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C21H26O13。化合物的1H-NMR,13C-NMR,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)詳見(jiàn)表1。綜合各譜數(shù)據(jù)及與文獻(xiàn)[1]對(duì)照鑒定化合物為7-O-β-D-Apiofuranosyl-(16)-β-D-Glucopyranosyl-Scopoletin(xeroboside)。表1化合物1的1H-NMR,13C-NMR,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)(略)
3.2化合物2
白色無(wú)定形粉末(凍干),[α]21.7D=-55.20(c=0.065甲醇∶水=40∶60),紫外燈365nm及254nm下均顯示藍(lán)綠色熒光,ESI-MSm/z:495[M+Na]+,示其分子量為472,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C20H24O13。化合物的1H-NMR,13C-NMR,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。綜合以上各譜數(shù)據(jù)及與已知文獻(xiàn)[2]對(duì)照鑒定化合物為aesculetin-6-O-β-D-apiofuranosyl-(16)-O-β-D-glucopyranoside。
3.3化合物3白色無(wú)定形粉末(氯仿-甲醇),mp207℃,[α]21.7D=+47.75(c=0.07甲醇∶水=40∶60),紫外燈365,254nm下均顯示藍(lán)色熒光。ESI-MSm/z∶407[M+Na]+示其分子量為384,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C17H20O10。化合物的1H-NMR,13C-NMR,COSY,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)詳見(jiàn)表3。綜合各譜數(shù)據(jù)[3]鑒定化合物為tomenin。表2化合物2的1H-NMR,13C-NMR,COSY,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)(略)表3化合物3的1H-NMR,13C-NMR,COSY,HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)(略)
3.4化合物4
白色無(wú)定形粉末(凍干),mp140~141℃,[α]19.4d=-52.30(c=0.06甲醇∶水=40∶60),紫外燈365及254nm下均顯示藍(lán)色熒光,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C16H18O9。1H-NMR(Pyridine-d5500MHz)δ:6.27(1H,d,J=9.5Hz,3-H),7.56(1H,d,J=9.5Hz,4-H),7.62(1H,s,5-H),6.90(1H,s,8-H),3.70(3H,s,OCH3),5.65(1H,d,J=7.1Hz,1-H-Glc)。綜合以上數(shù)據(jù)及與已知文獻(xiàn)[4]對(duì)照鑒定化合物為isoscopolin。
3.5化合物5
白色無(wú)定形粉末(凍干),[α]21.7D=-55.20(c=0.065甲醇∶水=40∶60),ESI-MSm/z:455[M+Na]+,示其分子量為432,結(jié)合1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C19H28O11。1H-NMR(Pyridine-d5500MHz)δ:7.07(2H,d,J=8.5Hz,3-H和5-H),7.19(2H,d,J=8.6Hz,2-H和6-H),2.96(2H,t,J=7.4Hz,β-H),4.34(1H,dd,J=7.5,11.2Hz,3''''a-α),3.88(1H,dd,J=7.4,11.2Hz,3''''a-α),4.82(1H,d,J=7.1Hz,1-H-Glc),5.75(1H,d,J=2.6Hz,1-H-Api)。13C-NMR(Pyridine-d5125MHz)δ:129.53(C-1),130.50(C-2),116.13(C-3),157.23(C-4),116.13(C-5),130.50(C-6),71.12(C-α),35.88(C-β),104.58(C-1-Glc),74.95(C-2-Glc),78.45(C-3-Glc),71.12(C-4-Glc),77.08(C-5-Glc),68.87(C-6-Glc),111.07(C-1-Api),77.74(C-2-Api),80.37(C-3-Api),75.00(C-4-Api),65.48(C-5-Api)。綜合以上數(shù)據(jù)及與文獻(xiàn)[5]對(duì)照鑒定化合物為OsmanthusideH。
4結(jié)果與討論
前人從茜草科植物山石榴Xeromphisspinosa[1]以及Xeromphisobovata[6]中分到過(guò)此化合物1,故此次為首次從傘形科中分離得到。但化合物的熔點(diǎn)有文獻(xiàn)[1]報(bào)道為238~234℃,有文獻(xiàn)[2]報(bào)道為192~197℃,而本次實(shí)驗(yàn)測(cè)得的熔點(diǎn)為170~172℃,具體原因有待進(jìn)一步確定。
前人從忍冬科植物L(fēng)oniceragracilipes[3]中分得化合物2,但是只報(bào)道了1H-NMR,13C-NMR譜數(shù)據(jù),且C-6和C-7的歸屬顛倒了。本文通過(guò)對(duì)其進(jìn)行HSQC,HMBC等二維譜的研究,糾正了前人的錯(cuò)誤,豐富了該化合物的波譜數(shù)據(jù)。
日本學(xué)者Hasegawa[3]最早從薔薇科植物Prunustomentosa中分離得到化合物3,但沒(méi)有報(bào)道核磁數(shù)據(jù),以后未見(jiàn)此化合物的報(bào)道。本文完善了該化合物的核磁數(shù)據(jù),并且用二維譜進(jìn)行了全歸屬,豐富了該化合物的波譜數(shù)據(jù),并首次報(bào)道了此化合物的旋光值。
化合物6在自然界植物中分布廣泛,但在傘形科植物中此類化合物較少見(jiàn)。
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一、化學(xué)科學(xué)知識(shí)水平
九年義務(wù)教育初中化學(xué)教學(xué)大綱,對(duì)初中化學(xué)教學(xué)的四大知識(shí)板塊分別提出了不同層次的教學(xué)要求,以確保學(xué)生在畢業(yè)時(shí)達(dá)到素質(zhì)教育所要求的知識(shí)水平。
1.對(duì)化學(xué)基本概念和原理、元素化合物這兩大知識(shí)內(nèi)容,按照學(xué)生的認(rèn)知水平以及在初中化學(xué)中的重要性,教學(xué)要求分為常識(shí)性介紹、了解、理解、掌握四個(gè)不同層次;2.對(duì)化學(xué)基本計(jì)算教學(xué)要求的層次是掌握。要求學(xué)生熟練掌握有關(guān)化學(xué)式、化學(xué)方程式、溶液等方面的基本計(jì)算;3.對(duì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)要求分為練習(xí)、初步學(xué)會(huì)兩個(gè)層次。在教學(xué)中,教師應(yīng)按要求認(rèn)真做好每個(gè)演示實(shí)驗(yàn),對(duì)于學(xué)生實(shí)驗(yàn),要積極創(chuàng)造條件,力爭(zhēng)使每個(gè)學(xué)生都有動(dòng)手做的機(jī)會(huì)。
新教材在編排上遵循大綱規(guī)定“初級(jí)中學(xué)的化學(xué)教學(xué)是化學(xué)教育的啟蒙階段”的原則,適當(dāng)降低了理論要求和精減了一些次要概念。為了配合素質(zhì)教育,培養(yǎng)學(xué)生面向未來(lái)的適應(yīng)力,增加了一些金屬、有機(jī)物(包括高分子化合物)以及保護(hù)生態(tài)環(huán)境、“溫室效應(yīng)”、硬水、氫能源、水和人類的關(guān)系、金屬和人體的關(guān)系、化肥、農(nóng)藥等內(nèi)容,體現(xiàn)了化學(xué)與生活,化學(xué)與社會(huì),化學(xué)與生產(chǎn)、科技的緊密聯(lián)系,為學(xué)生達(dá)到規(guī)定的化學(xué)科學(xué)知識(shí)水平創(chuàng)造了條件。應(yīng)該明確,在構(gòu)成化學(xué)科學(xué)素質(zhì)的諸多要素中,化學(xué)科學(xué)知識(shí)水平始終處于基礎(chǔ)和核心的地位。
二、化學(xué)科學(xué)能力
化學(xué)科學(xué)能力是指學(xué)生在學(xué)習(xí)化學(xué)知識(shí)、應(yīng)用化學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的過(guò)程中,表現(xiàn)出的心理與個(gè)性特征。它包括對(duì)物質(zhì)形態(tài)與變化的觀察和感知;化學(xué)知識(shí)的記憶和想象;對(duì)微觀世界和化學(xué)現(xiàn)象的理解、概括、抽象、推理和論證;應(yīng)用化學(xué)科學(xué)知識(shí)解釋客觀世界和解決實(shí)際問(wèn)題的能力。對(duì)于處在化學(xué)教育啟蒙階段的初中學(xué)生,應(yīng)從觀察能力、實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Α⑺季S能力、自學(xué)能力等方面,培養(yǎng)和提高他們的化學(xué)科學(xué)能力。
1.觀察能力。觀察能力是知覺(jué)的特殊形式,是一種有目的、有計(jì)劃、主動(dòng)的、持久的知覺(jué)過(guò)程,是和思維緊密結(jié)合的主動(dòng)知覺(jué)活動(dòng)。觀察能力是智力三要素(觀察、思維、創(chuàng)造)之一,是智力發(fā)展的基矗化學(xué)是一門(mén)以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的學(xué)科。觀察和實(shí)驗(yàn)是化學(xué)最基本的研究方法。通過(guò)能動(dòng)的、客觀的、定性、定量的綜合觀察,從實(shí)驗(yàn)的宏觀現(xiàn)象入手,揭示和認(rèn)識(shí)微觀變化的本質(zhì)。觀察能力不是單一的知覺(jué)感知,而是諸多因素綜合性的智力過(guò)程。新教材增加了多幅彩圖、插圖、章頭圖和多項(xiàng)演示實(shí)驗(yàn),并在學(xué)生實(shí)驗(yàn)前增設(shè)了思考題,啟發(fā)學(xué)生養(yǎng)成自覺(jué)觀察的良好習(xí)慣。教師除應(yīng)做好每一個(gè)演示實(shí)驗(yàn)外,還應(yīng)在課堂教學(xué)、課外活動(dòng)中,激發(fā)學(xué)生的觀察興趣,教會(huì)他們?nèi)绾斡^察。通過(guò)學(xué)生動(dòng)手動(dòng)腦,由表及里,去粗取精,去偽存真的觀察和思考,不斷提高他們的觀察能力,避免只看“熱鬧”,不看“門(mén)道”的不良習(xí)慣。
2.實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Α?shí)驗(yàn)?zāi)芰κ怯心康牡卦谌藶榭刂茥l件下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),認(rèn)識(shí)和發(fā)現(xiàn)化學(xué)變化規(guī)律的能力。實(shí)驗(yàn)?zāi)芰劝▽?shí)驗(yàn)操作能力,又包括推理、計(jì)算、對(duì)數(shù)據(jù)分析處理以及對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)論歸納總結(jié)、準(zhǔn)確表述的能力。
教師應(yīng)從以下幾個(gè)方面培養(yǎng)和提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Γ孩倌苷_操作實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備;②明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康模虎哿私鈱?shí)驗(yàn)原理;④掌握實(shí)驗(yàn)方法;⑤對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行準(zhǔn)確的觀察和記錄;⑤對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析處理,導(dǎo)出結(jié)論,寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
教師應(yīng)積極創(chuàng)設(shè)實(shí)驗(yàn)條件,努力完成全部必做實(shí)驗(yàn)。有條件的適當(dāng)做一些選做實(shí)驗(yàn),鼓勵(lì)和指導(dǎo)學(xué)生做一些家庭小實(shí)驗(yàn),克服“教師黑板上講實(shí)驗(yàn),學(xué)生考試背實(shí)驗(yàn)”,只注重理論學(xué)習(xí),不重視實(shí)驗(yàn)教學(xué)的弊端。充分發(fā)揮學(xué)生的獨(dú)立性和創(chuàng)造性,培養(yǎng)和提高他們動(dòng)手、動(dòng)腦能力,以及實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)肅認(rèn)真的工作作風(fēng)。
3.思維能力。思維是人類在事物表象、概念的基礎(chǔ)上進(jìn)行分析、綜合、判斷、推理等認(rèn)識(shí)活動(dòng)的過(guò)程。其中分析和綜合是思維的最基本的過(guò)程。新教材正確處理了知識(shí)的邏輯順序和學(xué)生生理、心理發(fā)展順序的關(guān)系,在敘述方法和行文方面,注意調(diào)動(dòng)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)、思考的積極性,以提高他們的抽象思維能力和自學(xué)能力。例如,在介紹物質(zhì)結(jié)構(gòu)的初步知識(shí)時(shí),通過(guò)實(shí)驗(yàn)和類比,引導(dǎo)學(xué)生從宏觀現(xiàn)象深入到微觀結(jié)構(gòu)的本質(zhì),通過(guò)提出問(wèn)題,引發(fā)思考,然后再概括出結(jié)論或概念,使學(xué)生從感性認(rèn)識(shí)上升到理性認(rèn)識(shí)。
4.自學(xué)能力。自學(xué)能力就是在已有知識(shí)水平和技能的基礎(chǔ)上,不斷獲取新知識(shí)并運(yùn)用這些知識(shí)的能力。化學(xué)教學(xué)的重要目的之一不僅是使學(xué)生“學(xué)會(huì)”,更重要是使學(xué)生“會(huì)學(xué)”。現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)發(fā)展迅速,知識(shí)更新周期縮短,如果不“會(huì)學(xué)”,就無(wú)法適應(yīng)日新月異的社會(huì)發(fā)展需要。因此,現(xiàn)代教育的一個(gè)重要特點(diǎn),就是培養(yǎng)學(xué)生不斷攝取新知識(shí)的自學(xué)能力,使學(xué)生受益終身。
三、化學(xué)科學(xué)思想水平
學(xué)生的化學(xué)科學(xué)思想水平包括以下幾個(gè)方面:
1.辯證唯物主義思想水平。?化學(xué)作為一門(mén)自然科學(xué),本身就具有豐富的辯證唯物主義素材。在化學(xué)教學(xué)中進(jìn)行辯證唯物主義觀點(diǎn)的教育,應(yīng)結(jié)合教學(xué)內(nèi)容,通過(guò)有機(jī)滲透,使學(xué)生逐步樹(shù)立起辯證唯物主義的世界觀和方法論,用對(duì)立統(tǒng)一、事物發(fā)展的矛盾性和統(tǒng)一性、量變到質(zhì)變等觀點(diǎn)學(xué)習(xí)和認(rèn)識(shí)化學(xué)問(wèn)題,提高學(xué)生應(yīng)用辯證唯物主義觀點(diǎn)觀察問(wèn)題和認(rèn)識(shí)問(wèn)題的能力。
2.實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。?初中化學(xué)啟蒙教育階段,應(yīng)結(jié)合教學(xué)內(nèi)容、化學(xué)史教學(xué),對(duì)學(xué)生進(jìn)行堅(jiān)忍不拔的精神、實(shí)事求是的態(tài)度、嚴(yán)肅認(rèn)真的作風(fēng)等方面的教育。通過(guò)多種方法與途徑培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)思維、研究方法和嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的治學(xué)精神。使學(xué)生認(rèn)識(shí)到一切科學(xué)知識(shí)都來(lái)源于實(shí)踐,又反過(guò)來(lái)指導(dǎo)實(shí)踐的道理。
3.愛(ài)國(guó)主義的思想水平。新教材結(jié)合教學(xué)內(nèi)容,注意對(duì)學(xué)生進(jìn)行愛(ài)國(guó)主義教育。如教材中介紹了祖國(guó)在化學(xué)科技方面取得的卓越成就,以增強(qiáng)學(xué)生的民族自豪感和自信心。密切結(jié)合能源、材料、資源等教學(xué)內(nèi)容,進(jìn)行國(guó)情教育和愛(ài)國(guó)主義教育,使學(xué)生樹(shù)立起為建設(shè)社會(huì)主義祖國(guó)而努力學(xué)習(xí)的使命感和遠(yuǎn)大目標(biāo)。
加里寧說(shuō),“我沒(méi)有看到一門(mén)不能教育青年熱愛(ài)祖國(guó),并培養(yǎng)他們具有最好的公民情感的科目。”化學(xué)也不應(yīng)例外。
4,環(huán)境保護(hù)意識(shí)水平。人類賴以生存的水圈、大氣圈、生物圈、巖石圈的物質(zhì)在不斷運(yùn)動(dòng)變化,并按一定程序循環(huán)著,組成了環(huán)境物質(zhì)的平衡體系。而人類在生產(chǎn)、生活中產(chǎn)生的污染卻破壞著人類賴以生存的環(huán)境。新教材的有關(guān)章節(jié)注意結(jié)合教學(xué)內(nèi)容,對(duì)學(xué)生進(jìn)行防止污染、保護(hù)環(huán)境的教育。教師應(yīng)通過(guò)“我們只有一個(gè)地球”的教育,讓學(xué)生認(rèn)識(shí)到環(huán)境保護(hù)的緊迫性和重要性,使學(xué)生從小養(yǎng)成愛(ài)護(hù)環(huán)境,保護(hù)環(huán)境的良好意識(shí)和習(xí)慣。
四、化學(xué)科學(xué)品質(zhì)
化學(xué)科學(xué)品質(zhì)指學(xué)生學(xué)習(xí)化學(xué)的動(dòng)機(jī)、興趣、情感和意志等。化學(xué)科學(xué)品質(zhì)是一種非智力因素,在一定條件下對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)水平起著十分重要的作用。
1.化學(xué)學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)。學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)是指引起和維持學(xué)生進(jìn)行學(xué)習(xí)活動(dòng),達(dá)到預(yù)定目的的意念。使學(xué)生明確學(xué)習(xí)目的是培養(yǎng)和激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)的最有效的方法。化學(xué)是一門(mén)非常重要的自然科學(xué)。現(xiàn)代社會(huì),不管是高科技或日常生活,都與化學(xué)科學(xué)息息相關(guān)。學(xué)好化學(xué)是我國(guó)四化建設(shè)的需要,是科學(xué)發(fā)展和人類進(jìn)步的需要。
在教學(xué)中應(yīng)始終貫穿理想教育這一主線,通過(guò)具體的實(shí)例,生動(dòng)有趣的教學(xué),使學(xué)生明確學(xué)習(xí)目的,強(qiáng)化學(xué)生的學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)。
2.化學(xué)學(xué)習(xí)興趣。化學(xué)學(xué)習(xí)興趣是指學(xué)生對(duì)化學(xué)力求認(rèn)識(shí)、趨近的一種心理傾向。興趣是學(xué)生學(xué)習(xí)的主要?jiǎng)恿ΑW(xué)習(xí)興趣使學(xué)生始終對(duì)學(xué)習(xí)保持良好的心理狀態(tài),并在其中得到樂(lè)趣和滿足。化學(xué)教學(xué)中豐富多采的實(shí)驗(yàn)為培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣創(chuàng)造了得天獨(dú)厚的教學(xué)情境。此外,使學(xué)生明確學(xué)習(xí)目的,采取有效的教學(xué)方法,教師淵博的知識(shí)等,都是激發(fā)和培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣的有效因素。
3.情感。情感是人們?cè)谡J(rèn)識(shí)客觀世界時(shí)所表現(xiàn)出的不同的心理反應(yīng)和態(tài)度。學(xué)生在學(xué)習(xí)過(guò)程中的愉快、熱情的良好情感,可使學(xué)生產(chǎn)生積極向上的心理狀態(tài)。悲傷、灰心、冷漠、煩躁等不良情感可給學(xué)生的學(xué)習(xí)帶來(lái)消極的影響。因此,在教學(xué)中對(duì)學(xué)生(尤其對(duì)差生)的熱愛(ài)、信任和尊重,教師高尚的人格,以及生動(dòng)有趣、形式多樣的教學(xué)方法,都是培養(yǎng)學(xué)生良好情感的重要因素。
4.意志。意志是人們?cè)谟幸庾R(shí)、有目的的行動(dòng)中表現(xiàn)出的一種契而不舍、克服困難的心理過(guò)程。任何學(xué)習(xí)過(guò)程都是復(fù)雜而艱辛的。學(xué)生在學(xué)習(xí)中會(huì)遇到不少困難與挫折,如深?yuàn)W的原理難以理解,習(xí)題難懂難做,不良情緒的干擾等。如果沒(méi)有堅(jiān)強(qiáng)的學(xué)習(xí)意志是不可能長(zhǎng)期堅(jiān)持單調(diào)學(xué)習(xí)并取得優(yōu)秀成績(jī)的。在化學(xué)教學(xué)中,教師應(yīng)通過(guò)多種方法和途徑培養(yǎng)和鍛煉學(xué)生的意志。如設(shè)計(jì)一項(xiàng)對(duì)環(huán)境污染進(jìn)行監(jiān)測(cè)的任務(wù),讓學(xué)生長(zhǎng)期堅(jiān)持去做。還可結(jié)合化學(xué)史教學(xué),介紹有關(guān)科學(xué)研究工作者為人類進(jìn)步不畏艱險(xiǎn)、奮勇登攀的優(yōu)秀品質(zhì)。
學(xué)生的化學(xué)科學(xué)素質(zhì)的“四要素”既有區(qū)別,又相互影響和促進(jìn)。在教學(xué)中,教師要處理好知識(shí)、技能和能力的關(guān)系。知識(shí)和技能是學(xué)生形成能力的基礎(chǔ),而能力是學(xué)生掌握知識(shí)和技能的必要條件,是促進(jìn)他們提高學(xué)習(xí)水平的重要因素。
一、造成分化的原因
(一)缺乏學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣和學(xué)習(xí)意志薄弱是造成分化的主要內(nèi)在心理因素。
對(duì)于初中學(xué)生來(lái)說(shuō),學(xué)習(xí)的積極性主要取決于學(xué)習(xí)興趣和克服學(xué)習(xí)困難的毅力。筆者對(duì)四處初中的抽樣調(diào)查表明,284名被調(diào)查學(xué)生中,對(duì)學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)有興趣的占51%,其中有直接興趣的47人,占15%;有間接興趣的85人,占30%;原來(lái)不感興趣,后因更換老師等原因而產(chǎn)主興趣的17人,占6%;對(duì)數(shù)學(xué)不感興趣或興趣軟弱的占49%,其中直接不感興趣的20人,占7%,原來(lái)有興趣,后來(lái)興趣減退的118人,占42%。調(diào)查中還發(fā)現(xiàn),學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)興趣比較淡薄的學(xué)生數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)成績(jī)也比較差,學(xué)習(xí)成績(jī)與學(xué)習(xí)興趣有著密切的聯(lián)系。
學(xué)習(xí)意志是為了實(shí)現(xiàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)而努力克服困難的心理活動(dòng),是學(xué)習(xí)能動(dòng)性的重要體現(xiàn)。學(xué)習(xí)活動(dòng)總是與不斷克服學(xué)習(xí)困難相聯(lián)系的,與小學(xué)階段的學(xué)習(xí)相比,初中數(shù)學(xué)難度加深,教學(xué)方式的變化也比較大,教師輔導(dǎo)減少,學(xué)生學(xué)習(xí)的獨(dú)立性增強(qiáng)。在中小銜接過(guò)程中有的學(xué)生適應(yīng)性強(qiáng),有的學(xué)生適應(yīng)性差,表現(xiàn)出學(xué)習(xí)情感脆弱、意志不夠堅(jiān)強(qiáng),在學(xué)習(xí)中,一遇到困難和挫折就退縮,甚至喪失信心,導(dǎo)致學(xué)習(xí)成績(jī)下降。
(二)掌握知識(shí)、技能不系統(tǒng),沒(méi)有形成較好的數(shù)學(xué)認(rèn)知結(jié)構(gòu),不能為連續(xù)學(xué)習(xí)提供必要的認(rèn)知基礎(chǔ)。
相比小學(xué)數(shù)學(xué)而言,初中數(shù)學(xué)教材結(jié)構(gòu)的邏輯性、系統(tǒng)性更強(qiáng)。首先表現(xiàn)在教材知識(shí)的銜接上,前面所學(xué)的知識(shí)往往是后邊學(xué)習(xí)的基礎(chǔ);其次還表現(xiàn)在掌握數(shù)學(xué)知識(shí)的技能技巧上,新的技能技巧形成都必須借助于已有的技能技巧。因此,如果學(xué)生對(duì)前面所學(xué)的內(nèi)容達(dá)不到規(guī)定的要求,不能及時(shí)掌握知識(shí),形成技能,就造成了連續(xù)學(xué)習(xí)過(guò)程中的薄弱環(huán)節(jié),跟不上集體學(xué)習(xí)的進(jìn)程,導(dǎo)致學(xué)習(xí)分化。
(三)思維方式和學(xué)習(xí)方法不適應(yīng)數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)要求。
初二階段是數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)分化最明顯的階段。一個(gè)重要原因是初中階段數(shù)學(xué)課程對(duì)學(xué)生抽象邏輯思維能力要求有了明顯提高。而初二學(xué)生正處于由直觀形象思維為主向以抽象邏輯思維為主過(guò)渡的又一個(gè)關(guān)鍵期,沒(méi)有形成比較成熟的抽象邏輯思維方式,而且學(xué)生個(gè)體差異也比較大,有的抽象邏輯思維能力發(fā)展快一些,有的則慢一些,因此表現(xiàn)出數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)接受能力的差異。除了年齡特征因素以外,更重要的是教師沒(méi)有很好地根據(jù)學(xué)生的實(shí)際和教學(xué)要求去組織教
二、減少學(xué)習(xí)分化的教學(xué)對(duì)策
(一)培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣
興趣是推動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的動(dòng)力,學(xué)生如果能在學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)中產(chǎn)生興趣,就會(huì)形成較強(qiáng)的求知欲,就能積極主動(dòng)地學(xué)習(xí)。培養(yǎng)學(xué)生數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)興趣的途徑很多,如讓學(xué)生積極參與教學(xué)活動(dòng),并讓其體驗(yàn)到成功的愉悅;創(chuàng)設(shè)一個(gè)適度的學(xué)習(xí)競(jìng)賽環(huán)境;發(fā)揮趣味數(shù)學(xué)的作用;提高教師自身的教學(xué)藝術(shù)等等。
(二)教會(huì)學(xué)生學(xué)習(xí)
有一部分后進(jìn)生在數(shù)學(xué)上費(fèi)工夫不少,但學(xué)習(xí)成績(jī)總不理想,這是學(xué)習(xí)不適應(yīng)性的重要表現(xiàn)之一。教師要加強(qiáng)對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)指導(dǎo),一方面要有意識(shí)地培養(yǎng)學(xué)生正確的數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)觀念;另一方面是在教學(xué)過(guò)程中加強(qiáng)學(xué)法指導(dǎo)和學(xué)習(xí)心理輔導(dǎo)。
(三)在數(shù)學(xué)教學(xué)過(guò)程中加強(qiáng)抽象邏輯思維的訓(xùn)練和培養(yǎng)。
要針對(duì)后進(jìn)生抽象邏輯思維能力不適應(yīng)數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)的問(wèn)題,從初一代數(shù)教學(xué)開(kāi)始就加強(qiáng)抽象邏輯能力訓(xùn)練,始終把教學(xué)過(guò)程設(shè)計(jì)成學(xué)生在教師指導(dǎo)下主動(dòng)探求知識(shí)的過(guò)程。這樣學(xué)生不僅學(xué)會(huì)了知識(shí),還學(xué)到了數(shù)學(xué)的基本思想和基本方法,培養(yǎng)了學(xué)生邏輯思維能力,為進(jìn)一步學(xué)習(xí)奠定較好的基礎(chǔ)。
(四)建立和諧的師生關(guān)系
一、溶膠是怎樣的概念
膠體從外觀上看貌似均勻,與溶液沒(méi)什么差異,因此膠體常稱為溶膠。溶膠與膠體是同一個(gè)概念。
二、對(duì)淀粉、蛋白質(zhì)等高分子溶于水形成的分散系,為什么有時(shí)稱其為溶液,有時(shí)又稱其為膠體
教材中是按分散質(zhì)微粒直徑的大小來(lái)給分散系分類的。淀粉、蛋白質(zhì)等高分子溶于水形成的分散系可稱為膠體。但是判斷一種分散系是屬于膠體還是溶液,單從分散質(zhì)微粒直徑的大小這一方面來(lái)考察,其結(jié)論是不全面的,甚至是錯(cuò)誤的。正確判斷一種分散系是溶液還是膠體,還要看分散質(zhì)微粒的結(jié)構(gòu)。如果分散質(zhì)微粒的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,比如是單個(gè)的分子或較小聚合度的分子或離子,那么這樣的分散系應(yīng)稱為溶液。由于淀粉、蛋白質(zhì)溶于水后都是以單個(gè)分子的形式分散在水中的,因此,盡管這些高分子很大,這些分散系仍應(yīng)稱為溶液。只是因?yàn)楦叻肿拥拇笮∨c膠粒相仿,高分子溶液才具有膠體的一些特性,如擴(kuò)散慢、不通過(guò)半透膜、有丁達(dá)爾現(xiàn)象等。化學(xué)上常把Fe(OH)3,AgI等難溶于水的物質(zhì)形成的膠體稱為憎液膠體,簡(jiǎn)稱溶膠;而把淀粉、蛋白質(zhì)等易溶于水的物質(zhì)形成的分散系稱為親液膠體,更多地是稱為高分子溶液。
三、溶液是均一的,膠體也均一嗎
憎液溶膠的分散質(zhì)微粒是由很大數(shù)目的分子構(gòu)成,因此是不均一的;高分子溶液中的分散質(zhì)微粒是單個(gè)的分子,因此是均一的。
四、膠體能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定存在的原因是什么
憎液溶膠的膠粒帶有相同的電荷,由于同性電荷的排斥作用而使憎液膠體可以穩(wěn)定存在。淀粉、蛋白質(zhì)等高分子中含有多個(gè)極性基團(tuán)(如—COOH,—OH,—NH2等),可以與水高度溶劑化(高分子表面形成水膜),因此也可較長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定存在。很明顯,這兩類膠體穩(wěn)定存在的原因是不同的。
五、溶液中的溶質(zhì)微粒也作布朗運(yùn)動(dòng)嗎
膠體微粒在各個(gè)方向上都受到分散劑分子的撞擊,由于這些作用力不同,所以膠體微粒作布朗運(yùn)動(dòng)。溶液中的溶質(zhì)微粒和分散劑分子大小相仿,因此溶質(zhì)微粒的運(yùn)動(dòng)狀況與膠體的膠粒運(yùn)動(dòng)狀況是有差別的。由于膠體的丁達(dá)爾現(xiàn)象,用超顯微鏡才可以觀察到膠粒的布朗運(yùn)動(dòng)。溶液無(wú)丁達(dá)爾現(xiàn)象,因此用超顯微鏡觀察不到溶質(zhì)微粒的運(yùn)動(dòng)狀況。
六、凝聚與鹽析有何差別
凝聚是憎液(水)膠體的性質(zhì),膠體的凝聚過(guò)程就是膠粒聚集成較大顆粒的過(guò)程。由于憎液(水)膠體的分散質(zhì)都難溶于水,因此,再采用一般的溶解方法用水來(lái)溶解膠體的凝聚物是不可能的,也就是說(shuō),膠體的凝聚是不可逆的。鹽析實(shí)際上就是加入電解質(zhì)使分散質(zhì)溶解度減小而使其析出的過(guò)程。鹽析不是憎液膠體的性質(zhì),它是高分子溶液或普通溶液的性質(zhì),能發(fā)生鹽析的分散質(zhì)都是易溶的,如淀粉溶液、蛋白質(zhì)溶液、肥皂的甘油溶液,由于分散質(zhì)都是易溶的,所以鹽析是可逆的。
七、蔗糖溶于水形成的分散系是溶液,為什么在生物課的滲透實(shí)驗(yàn)中,蔗糖分子卻不能通過(guò)半透膜
不同的半透膜,如羊皮紙、動(dòng)物膀胱膜、玻璃紙等,其細(xì)孔的直徑是不同的,也就是說(shuō),不同的半透膜,其通透性是不一樣的。顯然,籠統(tǒng)地講半透膜能使離子或分子通過(guò),而不能使膠體微粒通過(guò)是不恰當(dāng)?shù)摹?/p>
八、憎液膠體與高分子溶液在性質(zhì)上有何異同
憎液膠體全面地表現(xiàn)出膠體的特性,高分子溶液則不然。這兩種分散系中的分散質(zhì)微粒都作布朗運(yùn)動(dòng),都有丁達(dá)爾現(xiàn)象;憎液膠體有電泳現(xiàn)象,淀粉溶液無(wú)電泳現(xiàn)象,而蛋白質(zhì)溶液則較為復(fù)雜;使憎液膠體凝聚的方法有:加入電解質(zhì)、給膠體加熱、加入帶相反電荷的膠體,使高分子溶液中的分散質(zhì)沉淀,主要是破壞高子分與分散劑間的相互作用,如加入大量的電解質(zhì)也能使淀粉、蛋白質(zhì)沉淀,這一現(xiàn)象稱為鹽析,它是可逆的。
九、有沒(méi)有溶液能產(chǎn)生類似于膠體的電泳現(xiàn)象
由于溶液是均一的,不存在“界面”,因此,給溶液通電不會(huì)產(chǎn)生界面移動(dòng)現(xiàn)象(即一極液面高,另一極液面低),但是有些溶液通電后卻可以產(chǎn)生一極溶液顏色加深,另一極溶液顏色變淺的現(xiàn)象。比如,給紫紅色KMnO4溶液通電一段時(shí)間后,陽(yáng)極附近溶液的顏色就會(huì)變深,陰極附近溶液的顏色就會(huì)變淺。這是由于通電后,紫紅色的MnO4-向陽(yáng)極移動(dòng),但卻不會(huì)在陽(yáng)極放電(MnO4-遠(yuǎn)比OH-難放電)的緣故。CuSO4溶液就不會(huì)產(chǎn)生類似的現(xiàn)象,因?yàn)镃u2+會(huì)在陰極放電。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,花錨屬植物的主要化學(xué)成分為(口山)酮及(口山)酮苷類、裂環(huán)烯醚萜類、三萜類、黃酮類以及一些生物堿類化合物等。
1.1(口山)酮及(口山)酮苷孫洪發(fā)等[4]從橢圓葉花錨中得到五種(口山)酮成分,分別為1,7-二羥基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮,1,5-二羥基-2,3,7-三甲氧基(口山)酮,1,2-二羥基-3,4,5-三甲氧基(口山)酮,1,5-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮和1,7-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮。
孫洪發(fā)等[5]又從橢圓葉花錨中得到3種(口山)酮苷成分,分別為1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮,1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5-三甲氧基(口山)酮和1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖[-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮。其中1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮(花錨苷)和1-o-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖[-2,3,5-三甲氧基(口山)酮(去甲氧基花錨苷)為該屬植物抗肝炎的兩種有效成分。
張德等[6]采用元素分析(EA)、核磁共振波譜(NMR)、質(zhì)譜(MS)、紅外光譜(IR)、紫外光譜(UV)、差示掃描量熱(DSC)等分析方法首次從藏藥花錨中分離得到兩種針狀結(jié)晶化合物,分別為1-羥基-3,7,8-三甲氧基(口山)酮(1-h(huán)ydroxy-3,7,8-trimethoxyxanthone)和1,7-二羥基-3,8-二甲氧基((口山))酮(1,7-dihydroxy-3,8-dimethoxyxanthone)。
高潔等[7]從橢葉花錨乙醇提取物醋酸乙酯萃取部分分離得到8個(gè)(口山)酮化合物,分別為1,7-二羥基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮,1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基(口山)酮,1,7-二羥基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮,1,7-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮,1,5-二羥基-2,3-二甲氧基(口山)酮,1-羥基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮,1-羥基-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮和1-羥基-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮。
1.2其它成分Rodrigaez等[8]從花錨中分離得到了一種的黃酮類葡萄糖苷;高光躍等[9]從橢圓葉花錨全草中測(cè)出含有獐牙菜苦苷和當(dāng)藥苷;Dhasmana等[10]從橢圓葉花錨全草中分離得到齊墩果酸和谷甾醇葡萄糖苷;Rodrigaez等[11]從花錨中分離得到了一種二糖酯裂環(huán)烯醚萜。
2藥理活性
花錨為藏蒙藥中治療肝膽系統(tǒng)疾病的常用藥物,其主要分布于我國(guó)的、青海、四川、甘肅等地藏民族地區(qū),目前對(duì)花錨藥理活性的研究報(bào)道較少,有待進(jìn)一步深入研究。
2.1保肝降酶作用張經(jīng)明等[12]采用花錨煎劑(含花錨苷)對(duì)CCl4造成的肝損傷模型的研究表明,花錨苷可明顯增加核糖核酸;藥理實(shí)驗(yàn)證明,花錨中的花錨苷和去甲氧基花錨苷具有明顯的保肝作用,可增加核糖核酸,增加肝糖元,促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成,促進(jìn)肝細(xì)胞的再生,加速壞死組織的修復(fù),是該植物抗肝炎的主要有效成分。周富強(qiáng)[13]通過(guò)不同劑量西寧花錨對(duì)CCl4實(shí)驗(yàn)性肝損傷后肝糖元的含量的研究,發(fā)現(xiàn)西寧花錨對(duì)CCl4損傷后小鼠肝糖元的儲(chǔ)存的恢復(fù)有一定的藥效,可顯著提高肝糖元的含量。
馬學(xué)惠等[14]在齊墩果酸防治CCl4引起的大鼠急性肝損傷作用的研究中,發(fā)現(xiàn)該藥物能使血清GPT明顯下降,肝內(nèi)甘油三酯積累量減少;同時(shí),能使肝細(xì)胞變性、壞死明顯減輕,糖原蓄積增加,具有明顯的保肝降酶作用。宮新江等[15]的齊墩果酸對(duì)環(huán)磷酰胺所致大鼠肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究表明,齊墩果酸能抑制環(huán)磷酰胺所致的肝細(xì)胞上清液ALT,AST及LDH活力升高,肝細(xì)胞MTT值減小,說(shuō)明齊墩果酸可抗環(huán)磷酰胺所致肝細(xì)胞損傷。
王曉峰等[16]采用原代培養(yǎng)的小鼠肝細(xì)胞,以3H-胸腺嘧啶和3H-亮氨酸摻入的方法,研究經(jīng)齊墩果酸預(yù)處理后的小鼠的肝細(xì)胞DNA和蛋白質(zhì)合成速率的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)齊墩果酸能促進(jìn)肝細(xì)胞DNA及蛋白質(zhì)合成,且合成速率明顯增高,具有保肝作用。另外王曉峰等[17]報(bào)道齊墩果酸在對(duì)小鼠肝內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶的直接作用時(shí),小鼠血清樣品與不同濃度的齊墩果酸分別作用后,谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性則顯著降低,說(shuō)明齊墩果酸對(duì)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性具有明顯抑制作用。
2.2降血糖作用苗德田等[18]研究了齊墩果酸對(duì)大鼠血糖的影響,結(jié)果顯示,齊墩果酸對(duì)化學(xué)性高血糖模型大鼠有顯著的降血糖作用。柳占彪等[19]用齊墩果酸對(duì)高血糖大鼠治療,結(jié)果發(fā)現(xiàn)單一的齊墩果酸具有降低高血糖的作用,同時(shí)在血糖降低時(shí)肝糖原和血清胰島素均有明顯升高。
2.3抗炎作用戴岳等[20]采用多種實(shí)驗(yàn)性炎癥模型證實(shí)齊墩果酸對(duì)二甲苯與乙酸引起的小鼠皮膚和腹腔毛細(xì)血管通透性增高及對(duì)角叉菜膠等多種致炎物引起的大量足墊腫脹都具有明顯抑制作用。
2.4抗氧化活性肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過(guò)氧化是造成肝損傷的重要原因之一,高潔等[7]在研究藏藥花錨中(口山)酮類成分及其抗氧化活性時(shí),從橢葉花錨乙醇提取物醋酸乙酯萃取部分分離得到8個(gè)(口山)酮化合物,且該類化合物在一定程度上能顯著抑制Fe2+-Cys誘導(dǎo)大鼠肝微粒體丙二醛的生成,有效降低肝微粒體膜的氧化損傷。因此,具有一定的抗氧化活性。
2.5其他作用橢圓葉花錨的干浸膏可提高單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能,具有調(diào)節(jié)體液免疫的作用,使降低的血清溶血素及脾細(xì)胞免疫溶血活性提高到正常水平[21]。另有報(bào)道橢圓葉花錨全草的氯仿可溶部分(富含口山酮葡萄糖苷)具有抗阿米巴作用[22]。
3人工栽培
高原野生重要植物資源的持續(xù)發(fā)展必須建立在生物資源可持續(xù)利用和生態(tài)環(huán)境保護(hù)的基礎(chǔ)上,培育地道地產(chǎn)中藏藥材是實(shí)現(xiàn)高原地區(qū)中藏藥資源可持續(xù)利用的主要途徑之一,也是保證中藏藥產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展的必然選擇。
3.1人工栽培的重要意義花錨屬與獐牙菜屬植物等同屬于藏茵陳類藥物,被稱為“藏藥中的奇葩”,是治療肝中毒、肝炎的最佳藥物之一。但是這種藥物資源一般生長(zhǎng)在人跡罕至的高寒缺氧環(huán)境中,其再生周期較長(zhǎng)甚至不能再生,藏茵陳供需矛盾也由此變得越來(lái)越突出。
盡管野生橢圓葉花錨在青藏高原地區(qū)分布廣泛,資源較為豐富。但是近十多年來(lái),隨著我國(guó)民族醫(yī)藥特別是藏藥事業(yè)的迅速發(fā)展,越來(lái)越多的企業(yè)開(kāi)始投資藏醫(yī)藥領(lǐng)域,橢圓葉花錨的藥用資源需求量快速增加。但是,藏藥產(chǎn)業(yè)一度出現(xiàn)重成品生產(chǎn)輕藥材來(lái)源、重開(kāi)發(fā)輕保護(hù)的問(wèn)題,造成過(guò)度的采挖及收購(gòu)現(xiàn)象,特別是在植物生長(zhǎng)階段的花期大量采收導(dǎo)致資源量銳減,野生植物資源日益枯竭。因此,對(duì)作為原料植物藥的橢圓葉花錨進(jìn)行人工栽培的研究具有十分重要的意義。
3.2人工引種栽培為了解決藏茵陳類藥材資源嚴(yán)重短缺的實(shí)際問(wèn)題,中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所經(jīng)過(guò)3年的栽培與試驗(yàn),成功地解決了以往藏茵陳種子萌發(fā)率低、出苗率低、人工栽培難以成活等關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題。3種藏茵陳類藥用植物——川西獐牙菜、抱莖獐牙菜和花錨人工種植成功,并通過(guò)鑒定。經(jīng)過(guò)專家的監(jiān)測(cè)和對(duì)比分析,這次人工栽培的3種植物,其主要有效成分齊墩果酸和芒果苷的含量基本接近于天然野生資源,川西獐牙菜的有效成分含量甚至顯著高于野生資源,人工條件下栽培藏茵陳類藥用植物的質(zhì)量及其本身的藥用價(jià)值完全可以得到保證。隨著青海省產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整,橢圓葉花錨人工引種栽培技術(shù)的開(kāi)發(fā)研究,青海省橢圓葉花錨人工種植規(guī)模逐漸擴(kuò)大。橢圓葉花錨人工引種栽培試驗(yàn)在該省也初見(jiàn)成效。陳桂琛等[23]對(duì)橢圓葉花錨的引種栽培的研究表明,栽培的橢圓葉花錨植株在植株高度、分枝數(shù)量、單株生物量等生長(zhǎng)狀況指標(biāo)明顯高于野生植株,其有效化學(xué)成分接近野生狀態(tài)的水平,說(shuō)明野生橢圓葉花錨的人工栽培是可行的。吉文鶴等[24]運(yùn)用RP-HPLC建立了花錨中青蘭苷、去甲氧基花錨苷和花錨苷的含量分析方法,為栽培花錨替代野生花錨入藥提供一定的科學(xué)依據(jù)。研究表明,栽培花錨中花錨苷和去甲氧基花錨苷的含量和在野生花錨中的含量相比無(wú)明顯差別,可以初步證明栽培花錨可以替代野生花錨入藥。紀(jì)蘭菊等[25]在研究栽培花錨的品質(zhì)能否代替野生花錨入藥時(shí),通過(guò)指紋圖譜的相似度分析,得出結(jié)論:同一產(chǎn)地的野生與栽培花錨藥材色譜分離圖疊加比較,顯示了良好的相似度。證明栽培花錨中的主要化學(xué)成分及數(shù)量符合花錨藥材的指紋特征,可以代替野生花錨藥材入藥。
3.3組織培養(yǎng)隨著對(duì)花錨屬植物藥用成分不斷深入的研究,藥用潛力的挖掘,該屬植物的需求量大大增加,造成了該屬植物野生資源的日益匱乏且面臨枯竭。該屬植物的人工引種栽培技術(shù)在一定程度上已經(jīng)可行,但是,還需要通過(guò)多種途徑來(lái)提高對(duì)其的培育效率。
藥用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用已有多年的發(fā)展歷史,但還有相當(dāng)多的植物目前尚沒(méi)有相應(yīng)的離體培養(yǎng)技術(shù)。目前,花錨屬植物的組織培養(yǎng)技術(shù)至今尚未見(jiàn)成功的報(bào)道,仍然是個(gè)空缺。因此,建立該屬藥用植物的離體快繁技術(shù)的需求日漸增加,它也是實(shí)現(xiàn)高原地區(qū)中藏藥資源可持續(xù)利用的主要途徑之一。
4最佳采集時(shí)期
從生物量的角度考慮,花期的生物量高于果期,更高于其他時(shí)期。楊慧玲等[26]在研究不同地區(qū)和生長(zhǎng)物候期藏藥花錨有效成分齊墩果酸的含量變化實(shí)驗(yàn)中,比較了野生狀態(tài)下不同海拔、栽培條件下不同生長(zhǎng)時(shí)期花錨的齊墩果酸含量,為確定該藥材的采收時(shí)期、不同地區(qū)藥材的質(zhì)量以及栽培地點(diǎn)的選擇提供理論依據(jù)。該研究發(fā)現(xiàn)花錨花期齊墩果酸含量最高,而幼苗期、蕾期和果期都低于花期的含量。因此,花期得到的藥材最多質(zhì)量也最好。
吉文鶴等[24]研究了花錨中去甲氧基花錨苷和花錨苷的含量隨著不同生長(zhǎng)期的變化趨勢(shì),為藥材的合理栽培和采收提供科學(xué)依據(jù)。該研究表明,去甲氧基花錨苷和花錨苷含量在營(yíng)養(yǎng)期含量最高,從6~9月逐漸降低,從抗肝炎活性成分的含量角度考慮,6月份(營(yíng)養(yǎng)期)為花錨的最佳采收期。
5結(jié)語(yǔ)
花錨屬植物是藏蒙藥中治療肝炎類疾病的常用藥物,全草入藥,具有重要的藥用價(jià)值。該屬植物的主要有效成分為(口山)酮及(口山)酮苷、裂環(huán)烯醚萜類、三萜類化合物及其它黃酮苷等,具有抗肝炎、抗氧化活性和降血糖等功效。在我國(guó),該屬植物藥用歷史較長(zhǎng),故具有很高的藥理研究?jī)r(jià)值,特別是有關(guān)抗肝炎方面的研究顯示出較大的市場(chǎng)潛力,值得進(jìn)一步深入研究;其降血糖作用、抗氧化活性和調(diào)節(jié)體液免疫的藥理活性研究報(bào)道較少,這些研究工作都亟待進(jìn)一步的深入;另外對(duì)野生植物的過(guò)度采挖造成資源貧乏,采用人工的方法達(dá)到該藥物資源的可持續(xù)利用也已成為目前及今后對(duì)該屬植物重點(diǎn)研究的目標(biāo)。
【參考文獻(xiàn)】
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1脂類
1.1多烯炔類成分
Aratake等[2]從印度尼西亞海綿Haliclonasp.中分離得到一種多元不飽和溴代脂肪酸6-bromo-icosa-3Z,5E,8Z,13E,15E-pentaene-11,19-diynoicacid(1),并通過(guò)核磁數(shù)據(jù)確定了其結(jié)構(gòu)。將分離得到的該化合物純化后進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn),研究表明其對(duì)NBT-T2大鼠膀胱上皮細(xì)胞有細(xì)胞毒性,半數(shù)抑制濃度(IC50)值為36μg/mL。Watanabe等[3]從Strongylophora屬海綿中分離得到3個(gè)多烯炔類成分strongylodiolA、B、C,它們對(duì)Molt-4腫瘤細(xì)胞有非常顯著的細(xì)胞毒活性,IC50值分別為0.35、0.85、0.80μg/mL。
1.2過(guò)氧化物
Plakinidae類過(guò)氧化物在海綿中比較常見(jiàn),該類成分在C-3、6位存在過(guò)氧橋,同時(shí)在C-3、4、6位有烷基鏈取代。Ernesto等[4]從中國(guó)南海簡(jiǎn)易扁板海綿Plakortissimplex中分離得到plakortideH(2)、I、J,運(yùn)用波譜學(xué)和化學(xué)的方法解析了其平面結(jié)構(gòu),并利用改良的Mosher法確定C-3、4、6手性位點(diǎn)的絕對(duì)構(gòu)型。plakortideH、I、J對(duì)鼠纖維肉瘤細(xì)胞WEHI164顯示出較強(qiáng)的活性,其IC50值分別為7.1、9.5、8.2μg/mL。并闡述了該類化合物的構(gòu)效關(guān)系,認(rèn)為過(guò)氧環(huán)是其具有細(xì)胞毒活性的活性位點(diǎn),若過(guò)氧環(huán)被破壞,其細(xì)胞毒活性則會(huì)消失。Dai等[5]通過(guò)活性篩選及分離手段從海綿Diacarnuslevii中分離得到4種結(jié)構(gòu)新穎的norsesterterpene過(guò)氧化物diacarnoxidesA~D,其中diacarnoxideB(3)顯示出顯著的活性,可以抑制低氧狀態(tài)下腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。海綿中分離得到的脂類化合物的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。
2大環(huán)內(nèi)酯類
來(lái)自海綿的大環(huán)內(nèi)酯類化合物結(jié)構(gòu)新穎、藥理活性多樣,其已經(jīng)引起越來(lái)越多的海洋藥物研究人員的關(guān)注。Johnson等[6]從海綿Cacospongiamycofijiensis中分離得到大環(huán)內(nèi)酯類聚酮化合物fijianolidesA(4)、B(5),及6種新型的fijianolidesD~I(xiàn)。fijianolidesA、B具有類似于紫杉醇的微管穩(wěn)定作用,其中fijianolidesB的作用強(qiáng)于fijianolidesA,且在嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠腫瘤細(xì)胞體內(nèi)評(píng)價(jià)中發(fā)現(xiàn):fijianolidesB可持續(xù)阻斷HCT-116腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)長(zhǎng)達(dá)28d。fijianolidesD~I(xiàn)在體外實(shí)驗(yàn)中也顯示了一定的抗HCT-116和MDA-MB-435細(xì)胞系活性,其中fijianolidesE、H可以阻斷細(xì)胞的有絲分裂。Chevallier等[7]從巴布亞新及利亞海綿Irciniasp.中分離得到一種有強(qiáng)細(xì)胞毒性的大環(huán)內(nèi)脂類化合物tedanolideC及其類似物。體外試驗(yàn)表明該化合物對(duì)HCT-116細(xì)胞有強(qiáng)的細(xì)胞毒性,從細(xì)胞周期分析中發(fā)現(xiàn)其可使細(xì)胞分裂停留在S期。Singh等[8]從新西蘭海綿Mycalehentscheli中分離得到亞微克級(jí)的大環(huán)內(nèi)酯類化合物pelorusideA、B。其中pelorusideB可以促進(jìn)微管的聚合,同紫杉醇一樣可以阻斷細(xì)胞的有絲分裂在G2期。
3肽類
在近30年中,研究人員從海綿中發(fā)現(xiàn)了大量結(jié)構(gòu)新穎且藥理活性強(qiáng)的肽類成分,部分化合物結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖3。海綿肽類化合物的研究能夠取得如此大的進(jìn)展,主要有以下幾個(gè)原因:(1)制備型高效液相色譜等分離純化技術(shù)的快速發(fā)展與應(yīng)用;(2)結(jié)構(gòu)54132鑒定方面,波譜解析技術(shù)的進(jìn)展,特別是2D-NMR和質(zhì)譜等技術(shù)在海洋肽類結(jié)構(gòu)測(cè)定方面的巨大推動(dòng)作用。很多海綿環(huán)肽類成分由于N-端的封閉、β-或γ-氨基酸殘基以及D-型氨基酸等新氨基酸存在,已經(jīng)不能通過(guò)Edman降解來(lái)獲取氨基酸序列的分析結(jié)果;(3)手性分離技術(shù)的發(fā)展,使研究人員能夠用極少量的樣品就可以確定某一氨基酸的絕對(duì)構(gòu)型。Ebada等[9]從印度尼西亞的加里曼丹島海綿Jaspissplendens中分離得到化合物jaspamide(6)和其兩個(gè)衍生物jaspamideQ、R。通過(guò)1D和2DNMR核磁數(shù)據(jù)、質(zhì)譜分析比較得到了jaspamide的準(zhǔn)確結(jié)構(gòu)。jaspamideQ、R可以抑制小鼠淋巴瘤L5178Y細(xì)胞的增殖,IC50值<0.1μg/mL。Plaza等[10]從帕勞群島深水水域海綿Theonellaswinhoei中分離得到3種新的類似于anabaenopeptin的多肽類化合物paltolidesA、B、C。paltolidesA、B、C在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中并沒(méi)有顯示出抗HIV-1活性或細(xì)胞毒性,但在亞微摩爾級(jí)顯示出對(duì)羧肽酶的選擇性抑制。Plaza等[11]從海綿Siliquariaspongiamirabilis中分離得到6種新的環(huán)肽化合物,它們分屬于celebesidesA、B、C(7~9)和theopapuamidesB、C、D。celebesidesA在單輪傳染性實(shí)驗(yàn)中抗HIV-1活性的IC50值為(1.9±0.4)μg/mL,而在非磷酸化的模擬實(shí)驗(yàn)中,celebesidesA即使在50μg/mL這樣的高濃度下仍無(wú)活性。theopapuamidesA、B、C對(duì)人體結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116顯示出細(xì)胞毒性,IC50值為2.1~4.0μg/mL,并且有強(qiáng)的抗真菌活性。Ratnayake等[12]從巴布亞新幾內(nèi)亞的海綿Theonellaswinhoei中分離得到一種結(jié)構(gòu)新穎的環(huán)肽theopapuamide,該化合物對(duì)CEM-TART和HCT-116細(xì)胞系均具有強(qiáng)的細(xì)胞毒性,半最大效應(yīng)濃度(EC50)值分別為0.5、0.9μmol/L。Robinson等[13]從兩種海綿Aulettasp.和Jaspissplendens中分離得到j(luò)asplakinolide和11個(gè)jasplakinolide類似物,其中有7個(gè)化合物為新化合物。jasplakinolideB顯示出非常強(qiáng)的細(xì)胞毒性,對(duì)人體直腸結(jié)腸惡性腺瘤細(xì)胞HCT-116的IC50值<1nmol/L,但是在細(xì)胞微絲試驗(yàn)中,即使IC50值為80nmol/L時(shí)也沒(méi)有顯示出微絲破壞活性。
4生物堿類
生物堿類成分是海綿化學(xué)成分研究的一個(gè)非常重要的領(lǐng)域。該類成分結(jié)構(gòu)獨(dú)特,其中許多化合物具有抗腫瘤、降壓、廣譜抗菌、抗病毒等生物活性。因此藥物開(kāi)發(fā)人員對(duì)從中尋找治療人類重大疾病的特效藥物寄予了厚望。
4.1吲哚類生物堿Dai等[14]從海綿Smenospongiacerebriformis中分離得到2個(gè)新化合物dictazolineA(10)、B(11),以及2個(gè)已知化合物tubastrindoleA、B,活性篩選結(jié)果表明該類化合物既沒(méi)有顯示出明顯的細(xì)胞毒性,也沒(méi)有抗菌活性。
4.2β-咔啉類生物堿Inman等[15]從巴布亞新幾內(nèi)亞海綿Hyrtiosreticulates中分離得到1個(gè)β-咔啉生物堿hyrtiocarboline(12),該化合物可選擇性抑制H522-T1肺非小細(xì)胞、MDA-MB-435黑素瘤細(xì)胞、U937淋巴癌細(xì)胞系的增殖。同時(shí)在該屬海綿中還分離得到dragmacidonamineA(13)、B。
4.3異喹啉類生物堿異喹啉類生物堿具有很好的抗微生物、抗腫瘤等藥理活性。ecteinascidin743(14)的開(kāi)發(fā)成功使我們認(rèn)識(shí)到了該類化合物具有廣闊的新藥開(kāi)發(fā)前景[16]。Pettit等[17]從海綿Cribrochalinasp.中分離得到了3個(gè)異喹啉生物堿cribrostatin3(15)、4、5,并通過(guò)X單晶衍射確定了其立體構(gòu)型。cribrostatin3、4、5顯示出很強(qiáng)的抑制卵巢癌細(xì)胞Ovcar-3增殖的活性,其IC50值分別為0.77、2.20、0.18μmol/L,對(duì)鼠白血病細(xì)胞P388也有很好的抑制增殖的活性,IC50值為2.49、24.6、0.045μg/mL。另外,這3個(gè)化合物還具有一定的抗微生物活性。
4.4溴代酪氨酸類生物堿溴代酪氨酸類生物堿是一類生物活性廣泛的成分。Carney等[18]從海綿Pasammaplysillapurpurea中分離得到bastadine(16),其對(duì)多種腫瘤細(xì)胞均表7R1=PO3H2R2=C2H58R1=PO3H2R2=C2H59R1=PO3H2R2=C2H56·1436·現(xiàn)出較弱的細(xì)胞毒性,在2μg/mL時(shí),對(duì)結(jié)腸腺癌、人肺癌細(xì)胞A5499、鼠淋巴白血病細(xì)胞P388和人體腫瘤細(xì)胞HT-2有毒性;當(dāng)濃度為2.5μg/mL時(shí),其對(duì)無(wú)腫瘤CV-1猴腎細(xì)胞有一定的毒性。另外,bastadine對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶II(IC50值為2.0μg/mL)及脫氫葉酸鹽還原酶(IC50值為2.5μg/mL)有抑制作用。Galeano等[19]從加勒比海綿Verongularigida分離得到9種bromotyrosine衍生的化合物,其中purealidinB(17)、11-hydroxyaerothionin(18)在10、5μmol/L時(shí)對(duì)利什曼原蟲(chóng)和瘧原蟲(chóng)顯示出選擇性抗寄生蟲(chóng)活性。
4.5吡咯類生物堿Mao等[20]從海綿Mycalesp.中分離得到18個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的脂溶性的2,5-二取代吡咯類成分(19)。這些化合物具有一定的阻斷缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)活性的作用,IC50值<10μmol/L。作用機(jī)制研究表明,該類化合物在一定濃度下可通過(guò)阻斷NADH-泛醌氧化還原酶(復(fù)合物I)來(lái)抑制線粒體的呼吸作用,以此來(lái)阻斷HIF-1的活性。Liu等[21]通過(guò)活性追蹤及色譜方法從海綿Dendrillanigra中分離得到4個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的具有分子靶向抗腫瘤活性的片羅素類成分neolamellarinA、neolamellarinB、5-hydroxyneolamellarinB和7-hydroxyneolamellarinA(20)。7-hydroxyneolamellarinA可以阻斷低氧誘導(dǎo)下T47D細(xì)胞中的HIF-1活性,IC50值為1.9μmol/L,也可以抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF),使其停留在分泌蛋白水平。季紅等[22]從中國(guó)南海海綿Iotrochotasp.中分離得到purpurone(21),它是該屬海綿中的特征性成分和主要抗氧化活性成分,其清除DPPH自由基的IC50值為19μg/mL。
4.6其他Morgana等[23]從海綿Petrosaspongiamycofijiensis中分離得到mycothiazole及類似物8-O-acetylmycothiazole、4,19-dihydroxy-4,19-dihydromycothiazole;mycothiazole可以抑制低氧誘導(dǎo)下腫瘤細(xì)胞中HIF-1的生成,IC50值為1nmol/L,抑制體外低氧刺激下腫瘤血管的生成,并在體外實(shí)驗(yàn)中還表現(xiàn)出一定的神經(jīng)毒性。Coello等[24]從肯尼亞的拉姆島海綿Mycalesp.中分離得到一種環(huán)狀二胺1,5-diazacyclohenicosane(22),并運(yùn)用HR-ESI-MS和1D、2D-NMR等波譜學(xué)方法確定了其結(jié)構(gòu)。該化合物對(duì)A549、HT29和MDA-MB-231腫瘤細(xì)胞株顯示出中等強(qiáng)度的抑制增殖活性,IC50值分別為5.41、5.07、5.74μmol/L。Hermawan等[25]從海綿Leucettasp.中分離得到一種新型聚炔類生物堿2-(hexadec-13-ene-9,11-diynyl-methyl-amino)-ethanol(23),并通過(guò)核磁數(shù)據(jù)確定其結(jié)構(gòu)。該生物堿對(duì)NBT-T2細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性,IC50值為2.5μg/mL。張浩等[26]從中國(guó)南海海綿Axinellasp.中分離得到hymenialdisine(24)和debromohymenialdisine(25)。這兩種化合物為吡咯烷生物堿成分,都是MAPK途徑抑制劑,其中hymenialdisine可以有效抑制影響絲裂原激活的蛋白激酶1的活性,其IC50值為6nmol/L,對(duì)GSK-3激酶以及CDK家族也顯示出很強(qiáng)的抑制活性,其IC50值為10~700nmol/L。debromohymenialdisine能夠具有抑制G2期DNA損傷檢查點(diǎn)、檢查點(diǎn)激酶1(Chk1)和2(Chk2)的活性,IC50值分別為8、3、315μmol/L。海綿中分離得到的生物堿類成分的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖4。
5甾醇
甾醇是一類分子中環(huán)戊烷駢多菲甾核的化學(xué)成分,是某些激素的前體,也是生物膜的重要組成部分。甾醇是存在于任何一種生物體內(nèi)的化學(xué)成分。目前在海洋生物中發(fā)現(xiàn)了200多種單羥基甾醇,大部分在海綿中都可以找到。另外,從海綿中還分離得到了大量的多羥基甾醇類成分,這些成分大都具有顯著的生理活性。Whitson等[27]從菲律賓海綿Spheciospongiasp.中分離得到3種新的甾醇硫酸鹽spheciosterolsulfatesA(26)、B、C,通過(guò)1D、2D-NMR和HR-ESI-MS等波譜方法確定了它們的結(jié)構(gòu)。這些化合物都可以阻斷蛋白激酶Cζ(PKCζ)的活性,IC50值分別為1.59、0.53、0.11μmol/L;在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中顯示其也可以阻斷NF-κB的活性,EC50值為12~64μmol/L。黃孝春等[28]從我國(guó)南海的蓖麻海綿BiemnafortisTopsent中分離得到9個(gè)甾體。這些化合物均為首次從蓖麻海綿中分離得到,其中化合物cholest-4-ene-3,6-dione(27)在淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)中對(duì)T和B淋巴細(xì)胞的增殖顯示出顯著的抑制活性。另外,對(duì)蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酯酶PTP1B也有顯著的抑制活性,其IC50值為1.6μmol/L。Morinaka等[29]從海綿Phorbasamaranthus中分離得到5種新的甾體咪唑類化合物amaranzoleB(28)~F和已知結(jié)構(gòu)的amaranzoleA(29)。amaranzoleB~F屬于含有不同羥苯咪唑基側(cè)鏈的類似物。amaranzoleA、C、D中C24位的C-N被C-O鍵取代分別得到化合物amaranzoleB、E和F。這兩類咪唑類類似物很可能是因?yàn)橄┍闹嘏牛碈24-N和C24-O交換,同時(shí)伴隨CO2的脫去而形成的。人結(jié)腸癌細(xì)胞HTC-116細(xì)胞毒活性測(cè)試結(jié)果表明,amaranzoleA無(wú)顯著毒性(IC50>32μg/mL)。Whitson等[30]從菲律賓的科隆島海綿Lissodendoryx(Acanthodoryx)fibrosa樣品中分離得到3個(gè)新的硫酸取代的甾醇的二聚體化合物fibrosterolsulfatesA、B、C,其中化合物fibrosterolsulfatesA(30)、B(31)具有較強(qiáng)的蛋白激酶CPKCζ抑制活性,IC50值分別為16.4、5.6μmol/L。Fattorusso等[31]從Clionanigricans中分離得到兩個(gè)結(jié)構(gòu)骨架異常奇特的甾體clionastatinsA(32)、B(33)。clionastatinsA、B為首次發(fā)現(xiàn)在自然界中存在的多鹵代androstane類甾體,它們對(duì)鼠纖維肉瘤細(xì)胞WEHI164、鼠巨噬細(xì)胞RAW264-7和人單核細(xì)胞THP-1顯示出中等強(qiáng)度的細(xì)胞毒活性,其IC50值為0.8~2.0μg/mL。Lu等[32]從昆士蘭北部海床收集得到的海綿Sollasellamoretonensis中分離得到兩種A環(huán)為芳香環(huán)的膽汁酸3-hydroxy-19-nor-1,3,5(10),22-cholatetraen-24-oicacid和3-hydroxy-19-nor-1,3,5(10)-cholatrien-24-oicacid。從海綿中分離得到的部分甾醇類成分的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖5。
6萜類
萜類化合物是一類分子結(jié)構(gòu)中具有(C5H8)n單元的不飽和烷烴及其衍生物。海綿中的萜類化合物結(jié)構(gòu)類型多種多樣,并且具有強(qiáng)烈生理活性。
6.1倍半萜Xu等[33]從海綿Hyrtiossp.中分離得到一種新的倍半萜–二氫醌puupehanol(35)及已知的化合物puupehenone和chloropuupehenone。puupehenone顯示出強(qiáng)的抗新隱球菌和念珠菌活性,最低殺真菌濃度(MFC)值分別為1.25、2.50μg/mL。
6.2二倍半萜黃孝春等[34]從南海倔海綿屬海綿Dysideavillosa中分離得到5種scalarane型二倍半萜化合物。抗腫瘤活性篩選結(jié)果表明,scalaradial對(duì)HL-60、BEL-7402、MDA-MB-435等腫瘤細(xì)胞株具有顯著的抑制活性,IC50值分別為3.4、5.8、4.8μmol/L。邱彥等[35]從中國(guó)南海海綿Hyrtioserectus中分離得到8個(gè)二倍半萜類化學(xué)成分,通過(guò)采用多種色譜手段進(jìn)行分離純化,應(yīng)用多種波譜分析技術(shù),并結(jié)合文獻(xiàn)對(duì)照,對(duì)所分離到的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。其結(jié)構(gòu)分別為furoscalarol、12-O-deacetyl-furoscalarol、16-deacetyl-12-epi-scalarafuranacetate、isoscalarafuran-A、scalarin(37)、12-O-deacetyl-19-deoxyscalarin、12-epi-deoxoscalarin、21-hydroxy-deoxoscalarin。印度尼西亞海綿Lendenfeldiasp.的脂類提取物可以抑制低氧誘導(dǎo)的T47D胸腺瘤細(xì)胞中hypoxiainduciblefactor-1的活性。Dai等[36]通過(guò)色譜分離技術(shù)分離得到結(jié)構(gòu)已知的homoscalarane型二倍半萜16β,22-dihydroxy-24-methyl-24-oxoscalaran-25,12β-olactone(38)、24-methyl-12,24,25-trioxoscalar-16-en-22-oicacid、12,16-dihydroxy-24-methylscalaran-25,24-olide、PHC-4andscalarherbacinA。它們不僅能夠抑制低氧誘導(dǎo)的HIF-1的活性(IC50值為0.64~6.9μmol/L),還有抑制T47D和MDA-MDA-MB-231胸腺腫瘤細(xì)胞的增殖活性。
6.3三萜海綿中三萜的種類和數(shù)量都相對(duì)較少,主要可以分為異臭椿型、siphonella型和羊毛甾烷型3大類。Dai等[37]通過(guò)活性篩選及多種分離手段從南非海綿Axinellasp.中分離得到7個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的sodwanone三萜類化合物3-epi-sodwanoneK(39)、3-epi-sodwanoneK-3-acetate、10,11-dihydrosodwanoneB、sodwanonesT~W和結(jié)構(gòu)新穎的yardenone三萜類化合物12R-hydroxyyardenone,以及結(jié)構(gòu)已知的化合物sodwanoneA、sodwanoneB、yardenone。sodwanoneV可同時(shí)阻斷低氧誘導(dǎo)和鐵離子螯合劑(1,10-鄰二氮雜菲)誘導(dǎo)下T47D胸腺腫瘤細(xì)胞中HIF-1的活性(IC50值為15μmol/L)。化合物3-epi-sodwanoneK、sodwanonesT、10,11-dihydro-sodwanoneB和sodwanoneA可以抑制T47D細(xì)胞中HIF-1的活性。化合物3-epi-sodwanoneK-3-acetate對(duì)T47D細(xì)胞有一定的細(xì)胞毒性(IC50值為22μmol/L),化合物sodwanonesV對(duì)MDA-MB-231胸腺腫瘤細(xì)胞有一定的細(xì)胞毒性(IC50值為23μmol/L)。唐生安等[38]采用多種色譜手段對(duì)中國(guó)南海海綿Jaspissp.的化學(xué)成分進(jìn)行了分離純化,應(yīng)用波譜分析技術(shù)(包括IR、MS、2D-NMR等),并結(jié)合文獻(xiàn)對(duì)照,對(duì)所分離到的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定,分別為異臭椿類三萜化合物stellettinA(40)~D、H、I、rhabdastrellicacidA和geoditinB。該類化合物具有很強(qiáng)的抗腫瘤、抗病毒等生理活性,所以極具研究開(kāi)發(fā)和應(yīng)用價(jià)值。
7展望
1.1儀器島津GCMS-QP-5000型氣質(zhì)聯(lián)用儀。
1.2試劑乙醚、無(wú)水Na2SO4(均為AR)。
1.3藥材金針菇樣品由廣東省蠶桑研究所提供,經(jīng)該所所員劉學(xué)銘研究鑒定,為白蘑科菌類植物金針菇Flammulinavelutipes。
2方法
2.1供試品溶液的制備藥材切成約1.5~2cm的段,取約80g,按照《中國(guó)藥典》附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法——甲法[4]操作,加蒸餾水800ml,加熱4h,收取揮發(fā)油提取器中油層和部分芳香水層,乙醚萃取,萃取液用無(wú)水Na2SO4脫水后備用。
2.2GC-MS分析
2.2.1色譜條件GC:DB-1石英毛細(xì)管色譜柱(30m×0.25mm),樣口溫度250℃;接口溫度230℃;載氣為氦氣;流速1.3ml·min-1;柱壓80kPa;分流比10∶1;進(jìn)樣量為1.0μl。升溫程序:初始柱溫60℃,保持1min,以10℃·min-1的速率升到280℃,保持5min。
2.2.2質(zhì)譜條件EI源(70ev),350V,雙燈絲;質(zhì)量范圍m/z40~450全程掃描,掃描間歇1.0s。檢測(cè)電子倍增器電壓1.4kV。檢索譜庫(kù)名稱NIST。
3結(jié)果
依法操作,得到揮發(fā)性成分的總離子流圖。扣除乙醚溶劑本底后分離得到30個(gè)組分,對(duì)相對(duì)含量較高的組分進(jìn)行質(zhì)譜分析,通過(guò)計(jì)算機(jī)檢索并與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照,鑒定出其中的6個(gè)組分。以扣除溶劑峰的色譜圖的全部峰面積作為100%,用歸一化法確定了各組分在揮發(fā)油中的相對(duì)含量。分析結(jié)果見(jiàn)表1,總離子流圖見(jiàn)圖1。表1金針菇揮發(fā)性成分中的化學(xué)成分及相對(duì)百分含量(略)
4討論
從GC-MS總離子流圖及GC-MS檢測(cè)結(jié)果可以看出,金針菇揮發(fā)性成分以亞麻酸為主,其相對(duì)含量達(dá)到32.74%。亞麻酸具有增長(zhǎng)智力、延緩衰老、降低血壓和膽固醇、抗菌、抗炎、抗腫瘤等活性[5~7],是降血壓、降血脂藥物和保健品的重要原料之一,應(yīng)進(jìn)一步研究,加以利用。
本研究首次從金針菇揮發(fā)性成分中鑒定出亞麻酸(32.74%)、軟脂酸(6.41%)、鄰苯二甲酸異丁酯(5.23%)、軟脂酸乙酯(4.96%)、鄰苯二甲酸丁酯(3.07%)、苯乙醛(1.95%)等成分,占其揮發(fā)性成分相對(duì)含量的54.36%,但還有24個(gè)組分尚未能鑒定出其結(jié)構(gòu),可能是由于金針菇揮發(fā)性成分屬首次研究,其中一些成分尚未收入NIST檢索譜庫(kù),有待于今后深入研究。
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