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苦了,自己含著,痛了,自己忍著,累了,自己受著,想放下了,就默默轉身,所有的所有,一切的一切,終將逝去的
淡忘一個人,最好的方法就是不斷的懷念她!
“晚安”,下午五點二十分。以為他依然不會回復,剛準備丟下手機入睡,“怎么了”,五點三十五分。我激動的拿起手機敲擊著鍵盤,“沒事,你還在忙么?”五點三十六分。時間滴答滴答一秒一分的過去,我看著屏幕卻再也沒有等到回復,直到天黑之前我也許已經入夢,夢你有你,有你在身邊,有你,而我不愿醒在這又一個黑夜里。
1、死了的人比活著的人有用!
2、黃四郎:黛玉、晴雯給我出來。師爺:怎么只出來一只女子?黃四郎:我給她起了個日本名字—-黛玉晴雯子!
3、師爺:你帶著老婆,出了城,吃著火鍋還唱著歌,突然就被麻匪劫了……
4、張麻子給師爺一分鐘時間,讓他說出錢在哪兒。師爺嚇得直哭。張麻子說:“哭也算時間哦!”
5、我要做的有三件事:公平,公平,還是他媽的公平!
6、誰是窮人?誰窮,誰就是窮人!
7、不好色的縣長不一定是好縣長。
8、我演砸了嗎?我怎么覺著才剛剛開始啊!
9、老三:她們是!是窮人嗎?老二:是窮人,是窮人賣掉的女兒!
10、這他媽的稅都收到公元2010年啦!
11、四爺,他們打我的屁股就等于打您的臉啊!
12、姜文摸著劉嘉玲的胸說:說好了,咱們是同床,但不入身。我若有不 規,手槍在此,你隨時可以干掉我!
13、張麻子:這是穆扎的曲子。()他們叫穆扎,咱們這里叫莫扎特。兒子:你還能聽出是穆扎來?張麻子:有時候能。兒子:什么時候?張麻子:唱片上寫著他名字的時候。
14、師爺:六個人,還當著人家男人的面,還開著燈。我都關著燈…太不要臉了,太不要臉了,呸!或者你花點錢,花不了多少錢,姑娘有的是…
15、師爺:我話到嘴邊了,你讓我再咽回去?張麻子:咽回去----你是個騙子,反正說出來也是假的!
16、師爺作深情狀,回憶道:那年她十七,我也十七……
17、師爺在臨死前對張麻子說:樹上的屁股兜里有五張委任書…
18、張麻子:湯師爺是我的至愛,您可不能奪我所愛啊!
19、黃四郎對手下胡萬說:如果你活著,早晚都會死;如果你死了,你就永遠活著。
20、張麻子:你給我他媽的翻譯一下他媽的到底什么是他媽的驚喜!
21、酒要一口一口地喝,路要一步一步地走—-步子邁大了,容易扯著蛋!
22、何止是愚蠢?簡直就是愚蠢!
23、做夫妻最要緊的是什么?恩愛;做縣長最要緊的是什么?忍耐!
24、師爺:寡婦不能碰啊!必有大災!張麻子:她已經成了寡婦了,我不能讓她再守活寡!
25、要有風,要有肉;要有火鍋,要有霧;要有美女,要有驢!
26、黃四郎:I”m sorry!胡萬堅定而又顫抖的回答:My pleasure,sir!
27、城里的女人就是白啊!
28、黃四郎:師爺高!縣長硬!師爺、張麻子:黃老爺又高又硬!
29、大哥,我討厭嗎?你要是覺得我不討厭,我就繼續欺負他。你要是覺得我討厭,我立馬消失!
30、花姐一把槍指著自己一把槍對著張麻子說:老二已經走了,現在老三也要離開了,我們三個就這樣被你拆散了!
31、老三:她們是!是窮人嗎? 老二:是窮人,是窮人賣掉的女兒!
32、世界上本沒有路,有了腿便有了路。
33、連小鳳仙是誰都不知道還當?那是譽滿全城的雞!
目前,洛米歐在虎門的辦公室已經空無一人,一片狼藉。
最近幾天,數百名全國各地的買家都在追討被“洛米歐”騙走的貨款。這個位于虎門的電商企業,從兩個月前以“蓋樓免單”誘惑,自建QQ群吸引上千買家,雙11當天通過活動高價拍下“貨不對板”的服裝。老板魏某隨后卷款走佬并解散QQ群。
經阿里巴巴統計,截至昨日已有超300名消費者表示聯系不上商家,涉及被騙總金額超400萬元。12月2日,警方已以“詐騙案”立案調查。南都記者調查發現,“洛米歐”老板魏某去年開始已債務纏身,其公司在虎門的辦公地點也已大門緊鎖。“失聯”前,他還欠下快遞公司及服裝加工廠的債務。
兩個月前開始“放餌釣魚”
“lorrmio洛米歐”旗艦店是天貓上一家主營歐美女裝的店鋪。受騙的買家們表示,洛米歐在微淘里舉行“蓋樓免單”活動,主要從9月份開始。
微淘,是手機淘寶APP里商家促進粉絲粘性和粉絲互動的欄目,目前每天有超過100萬條信息在微淘里滾動。商家會與粉絲(買家)進行許多互動和正常促銷,比如“蓋樓蓋到某層”可以獲得一定數額優惠,“蓋樓蓋到某層”拍下寶貝(貨物)好評可全額返現等。
“這都是正常的促銷手段,很多商家經營早期都曾舉行過,主要是吸引人氣。”曾舉辦過類似活動的商家向南都記者表示,正常情況下商家只會在某個時間段拿出小部分的商品進行這樣的互動。
“雙十一”當天,洛米歐在自建QQ群里的活動,幾乎是全員參與。廣州的買家張先生說,他從今年9月份開始參加洛米歐的免單活動。以往規則是,每小時的每10分鐘第一個對商品發表評論的人可以免單,即買家拍一件衣服、付款,賣家會在15天以后發貨,等買家收到貨給個五星好評,賣家會返還貨款。
“每次參加活動,確實都能收到全額返款。”張先生表示,幾次互動下來,越來越多的買家增加了對洛米歐信任,“等到雙11,活動群里的人已經超過1000人,商家說店鋪里掛的每件服裝都可以參加活動。”
高價拍下衣服“貨不對板”
河南鄭州的陳小姐,跟張先生一樣在雙十一前已經參加過洛米歐多次“免單”活動,不但能收到衣服,還獲得免單。雙十一當天,洛米歐的“免單”活動力度開始加大,但是買家們發現衣服標價越來越貴,原來只要100多元/件的衣服漲到了500多元/件,而且是“全天瘋狂免單”,先是“雙11”開始前10分鐘拍下的衣服全部免單,然后又增加多個免單時段。
“瘋狂”過后,張先生花了17000多元拍下多件衣服。與他一樣,群里不少買家都參與了活動,花費在數百元至上萬元不等。按照以往的約定,買家們拍下衣服后15天,賣家發貨;買家收貨后給予好評,通過淘寶平臺確認收貨并用支付寶付款,賣家收到錢后將買家的免單信息登記,然后返款給買家。
但是,買家們很快就發現問題。他們花高價拍下的衣服陸續到貨,但很多不是雙11期間挑中的,而是一些質量低廉的衣服。買家們在QQ群里發問,賣家客服則表示,“雙十一拍的衣服太多,廠家生產不過來,先暫時發一批貨,不對的登記下來后再調換,返款還是可以進行。”
11月27日,原本是約定返款的日子。當天凌晨3點,洛米歐店主魏某突然在QQ群里一段“告白”,稱自己因家庭原因被高利貸逼其還錢,迫不得已要離開一段時間……。
買家被騙金額超過400萬元
“告白”完畢后,QQ群的管理人員將里面的買家成員逐一踢出,并最終解散了整個Q群。這個突如其來的“變故”,讓來自全國各地的買家們慌成一團,他們邊向阿里巴巴淘寶方面舉報,并各自向當地的派出所報警。11月30日,在淘寶天貓上搜索“洛米歐”時,已顯示“店鋪不存在或者店鋪狀態異常”。
截至昨日,阿里巴巴匯總發現,已有超300名消費者表示聯系不上商家,涉及被騙總金額超400萬元。買家們表示,雙十一的蓋樓活動的信息主要是在洛米歐自建的QQ群里,按照正常程序在天貓上進行購物、確認收貨、付款,現在錢已經全部打到賣家賬戶內,賣家僅有5萬元押金留在天貓,“5萬押金,相比超400萬的詐騙金額,根本起不到什么作用。”
南都記者了解到,經過阿里巴巴方面的協助,12月2日當天,警方已以“詐騙”對洛米歐事件進行立案偵查。
記者調查
洛米歐在虎門已欠債累累
阿里巴巴及買家們提供的信息顯示,lorrmio洛米歐旗艦店是東莞市格絲服飾有限公司旗下品牌。營業執照顯示,格絲屬自然人獨資企業,成立于2014年4月,地址位于東莞市虎門鎮一家電商產業園內。
11月30日,南都記者實地走訪發現,格絲服飾有限公司在電商園區內的辦公區域已是鐵鎖加掛、大門緊閉,里面一片狼藉,衣物亂堆。門口還不時有退換的快遞包裹,上面留下的發貨人聯系電話,已處于停機狀態。
園區的知情人士表示,自從2014年進駐后,魏某及其公司就債務纏身,除了拖欠湖北老家的貸款外,魏某還欠虎門當地加工廠和快遞公司的貨款,經常有債權人前往公司要賬。目前,魏某已徹底處于失聯狀態。
而園區內一家快遞公司的員工也表示,格絲服飾有限公司的員工一共只有3個人,最近幾個月的快遞費還算正常,但從10月份開始就經常拖欠。魏某當時還承諾,公司正在忙著“雙十一”的活動,等到11月底會一并結清。誰11月27日事態爆發后,快遞公司找上門時才發現該公司已人去樓空,除了快遞公司被拖欠3萬元快遞費,多家加工廠也被魏某拖欠數額不等的加工費。
消費提醒
阿里:別用第三方聊天工具進行交易
阿里巴巴方面表示,洛米歐此前在天貓上的經營一切都正常,顧客也是通過正常的渠道去購物、確認付款,但是他們雙方私自在QQ群里所的消息,已經超出了阿里的監管,單從表象很難察覺。若非消費者本次集中反映,難以發現他們私下進行如此高風險的活動。事發后,阿里已積極協助警方展開調查。
阿里巴巴安全部的最新數據顯示,自2015年1月起至今,據不完全統計,類似的既遂、未遂案件共計逾10萬起。阿里安全小二已經協助上海、武漢等地警方破獲多起因此發生的詐騙案。
阿里安全再次提醒:上網購物時,旺旺是阿里巴巴官方認可的唯一安全的聊天工具,發生糾紛時只以旺旺聊天記錄為最有力憑證。其他第三方聊天工具均無法成為強有力的維權工具。
騙局揭秘
“蓋樓免單”蓄積客戶
洛米歐開展“蓋樓優惠”或“蓋樓免單“等促銷活動,即一定時段第一個對商品發表評論的人可以免單,即買家拍一件衣服付款,買家收到貨給好評,賣家會返還貨款,以此吸引越來越多的買家成為洛米歐的粉絲。
“雙十一”瘋狂促銷
“雙十一”當天,洛米歐自建QQ群里活動,群里買家超過1000人,衣服標價翻倍,但“免單”活動力度加大,增加多個免單時段,吸引大量買家瘋狂下單。
目的:分析臨床護理路徑在電視腹腔鏡膽囊切除術中的護理效果。方法:選取2010年6月~2013年3月于我院進行電視腹腔鏡膽囊切除術患者共118例,隨機分為實驗組和對照組各59例進行對比,在進行電視腹腔鏡膽囊切除術中,對照組實施傳統護理模式,實驗組實施臨床護理路徑模式。后將兩組術中手術持續時間、患者首次下床時間以及住院天數進行比較。結果:經研究比較,實驗組其手術持續時間、住院天數與對照組比較,P均0.05,無統計學差異。結論:電視腹腔鏡膽囊切除術中臨床護理路徑應用優于傳統護理模式,流程合理,利于規范醫療護理行為,提高醫療護理質量,值得應用于臨床。
關鍵詞: 臨床護理路徑;傳統護理模式;電視腹腔鏡膽囊切除術
【中圖分類號】
R453 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763(2014)08-0108-01
降低醫療成本與提高醫療服務質量是各醫院追求的目標,如何解決這兩方面的之間的矛盾,近年來,各地醫院紛紛采用臨床護理路徑作為解決該問題的途徑。臨床護理路徑(CNP)是醫生、護士和其他專業人員共同協作,針對某個診斷或手術所做的最適當有順序性和時間性的照顧計劃以減少康復的延遲與資源的浪費,使服務對象獲得最佳的照顧質量[1]。旨在提高護理質量的同時降低醫療成本。電視腹腔鏡膽囊切除術(LC),是利用電視腹腔鏡治療膽囊疾病的一種新方法,為探討臨床護理路徑在電視腹腔鏡膽囊切除術中的護理效果,筆者對我院2010年6月~2013年3月將臨床護理路徑運用于電視腹腔鏡膽囊切除術中療效滿意,現報告如下:
1 資料與方法
1.1 臨床資料:
選取2010年6月~2013年3月于我院進行電視腹腔鏡膽囊切除術患者共118例為研究對象,全部病例均經B超、口服和靜脈膽道雙重造影。將其隨機分為實驗組59例和對照組59例。對照組59例患者中,女性34例,男性25例,年齡24 ~ 68歲,平均(45.3 ± 5.3)歲,確診為膽囊息肉14例,單純膽囊結石45例;觀察組59例患者中,女性35例,男性24例,年齡24 ~ 69歲,平均(45.5 ± 5.4)歲。確診為膽囊息肉15例,單純膽囊結石44例。兩組患者在年齡、性別構成比、疾病分型等基本資料方面進行比較,差異無統計學意義(P均>0.05),說明兩組患者具有可比性。
1.2 方法:
兩組患者均接受電視腹腔鏡膽囊切除術,對照組59例患者在術中按照傳統的護理模式進行護理。實驗組59例患者根據院內制定的臨床護理路徑表, 由主管醫生和責任護士按照臨床路徑表實施標準化的治療護理流程, 使電視腹腔鏡膽囊切除術有序進行。臨床護理路徑的主要內容為:術前訪視:患者實施手術前,由責任護士對患者進行訪視,了解患者的情緒狀況,向患者講解手術流程,注意事項,耐心回答患者的提問,針對患者的實際情況,采取針對性的心理疏導,打消患者對手術的擔憂、恐懼,緩解患者的緊張情緒,對患者進行手術術野的清潔、消毒,向患者講解飲食注意、個人衛生的保持事項;患者由護理人員陪同進入手術室,手術護士和患者核對患者個人信息,手術信息,降低差錯事故;術中護理人員應加強對患者的生命體征、各項指標的觀察,術后護送患者到達病房,向患者家屬講解自我護理的注意事項,耐心解答家屬的提問,必要時應進行示范操作,確保家屬充分理解自護操作,確保自我護理質量,根據術后護理規范,對患者的、各項生命指征觀察、患者傷口護理、給藥等方面的護理。護理人員的所有護理行為均以表格化呈現,每完成一項均需進行確認,需要家屬或者患者確認的應有患者或家屬的確認記錄。每個單元的護理完成,應仔細檢查核對有無遺漏,確保護理完整規范。
1.3 觀察指標:
觀察兩組在術中不同護理模式下,記錄每次手術持續時間、患者首次下床時間以及患者的住院天數。
1.4 統計學處理:
對文中所得數據進行相關的統計學處理,軟件選用SPSS 15.0,計量資料采用t檢驗,計數資料采用χ2檢驗,采用P
2 結果
2.1 兩種術中護理模式下,手術持續時間、患者首次下床時間以及住院天數結果的比較。
兩組術中護理模式情況的比較,實驗組手術持續時間、住院天數明顯低于對照組,P均
3 討論
電視腹腔鏡膽囊切除術在臨床上已廣泛應用,與傳統的膽囊切除術相比,其具有創口小、出血少、患者的順應性好、術后并發癥少、住院時間短等優點。保證手術的成功,術中的護理尤為重要。臨床護理路徑是一種醫護規范,對特定的病種或病例進行標準化醫護計劃,是臨床管理的重要工具,能夠指導護士有預見性地、主動地工作,也使患者自覺參與護理過程中。臨床護理路徑通過程序化的模式,便于患者自行檢查護理過程中是否出現疏漏,如果出現了疏漏也能及時發現,降低了護理差錯事件的發生率。降低了住院時間和住院費用,使患者獲得最佳服務,減少康復延遲和醫療資源浪費[2]。臨床護理途徑與傳統的護理模式相比,具有以下優點:首先,應用臨床護理途徑能夠縮短患者的住院時間降低醫療成本。其次,應用臨床護理途徑能夠提升臨床護理的質量,使得臨床護理工作順利進行進而提高醫療服務質量。第三,應用臨床護理途徑,護士可按照路徑表應用護理程序有預見性、主動性開展護理工作,不再機械性的執行醫囑[3-4]。提高護士的專業自主性。通過本研究的結果,通過以上實驗組和對照組的結果比較,我們可以得出類似的結論,將臨床護理路徑應用于電視腹腔鏡膽囊切除術中,使患者對疾病相關知識有了進一步的認識和理解,降低患者對手術的恐懼,從而提高患者在手術過程中的自覺性,便于手術的開展。臨床護理路徑規范了規范了護理服務流程,使護士充分做好術特殊儀器的準備,護士了解了手術的流程,使得巡回護士的配合得當,器械護士的配合得體[5-6]。為手術的順暢奠定了基礎。
綜上所述,電視腹腔鏡膽囊切除術中臨床護理路徑應用使得手術的持續時間、患者首次下床時間以及住院天數明顯縮短。因此臨床護理路徑應用于電視腹腔鏡膽囊切除術中設計流程合理,利于規范醫療護理行為,提高醫療護理質量,值得臨床推廣應用。
參考文獻
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關鍵詞神經通路;神經植入探針;傳感后單集成芯片;微型生物可穿戴設備
1引言
谷氨酸(Glutamate,Glu)是神經內關鍵的興奮性神經遞質之一,其代謝與大神經認知、記憶、運動、神經元可塑性等功能相關[1]。神經信息傳導具有神經電生理和神經遞質兩種方式。對神經內谷氨酸和神經電生理并行檢測有利于全面研究神經系統功能。目前,針對谷氨酸和電生理信號的文獻報道都是利用單模手段,而在體雙模檢測報道很少。如2015年Kanamori結合EEG電極和微透析的雙模檢測法,在體研究大鼠神經內谷氨酸濃度增加的現象[2]。2014年Tani等[3]在神經片中分離出海馬CA3區和皮層的谷氨酸能神經突觸,通過的功能特別依賴于谷氨酸信號轉運,因此熟悉海馬生理結構,并從神經電生理、谷氨酸遞質傳導等方面分析海馬區的神經傳導通路,是海馬區相關神經疾病研究的重要方法。他們采用膜片鉗記錄電刺激后的離子通道信號,并使用熒光共振能量轉移技術測量谷氨酸釋放。不論基于神經調控進行病理、藥理研究,還是研究某特定神經區神經回路的作用機制,在體實時獲得相關神經區電生理和谷氨酸化學遞質信號的雙模并行變化具有重要意義[4]。谷氨酸與相關化合物通過延長興奮性突觸傳遞作用導致神經元破壞,引發興奮性毒性,從而引發癲癇、神經創傷、神經缺血等急性神經元損傷。通常情況下,釋放到突觸間隙的谷氨酸濃度可達1mmol/L,時間維持10
3s,在突觸間隙的谷氨酸長期累積,引起谷氨酸受體受到過分刺激,從而導致神經元損害甚至死亡。海馬(Hippocampus)是脊椎動物(包括人類)大腦神經的重要組成,在記憶形成和空間感知中具有非常關鍵的地位。海馬區結構和功能的改變與癲癇、阿爾茨海默病、精神分裂癥等神經疾病關系密切,是病理研究的重要神經區之一[5]。長期增強效應作為神經可塑性重要形式即在海馬區被第一次發現[6]。海馬區神經電信號分類和特征分析在神經疾病研究中具有重要意義,而海馬區的功能特別依賴于谷氨酸信號轉運,因此熟悉海馬生理結構,并從神經電生理、谷氨酸遞質傳導等方面分析海馬區的神經傳導通路,是海馬區相關神經疾病研究的重要方法。
本研究運用納米材料修飾技術、微納加工制造技術、酶生物傳感技術、神經調控技術,設計了一款雙模(電生理電位與谷氨酸化學遞質)并行檢測的植入式、8通道神經信息檢測器件,并進行在體測試研究。同時,神經器件檢測的動作電壓信號被后續后端電路進行放大、濾波、去噪、模擬到數字信號轉換、功耗優化、并且電路模塊高度集成,圖1為本研究設計的神經信號處理傳感芯片系統整體,并且該微型可穿戴系統[7]可以移植到手機及其它便攜生物信號檢測終端。
2SOIMEMS谷氨酸檢測神經植入傳感器和信號處理集成單芯片制備
2.1MEMS植入神經探針制備
本實驗采用SOI自停止技術形成硅基底,SOI硅片中間二氧化硅氧化層可作為背面基底濕法腐蝕的自停止層。MEMS神經信息傳感探針基于三層光刻工藝,利用了3塊掩膜版,如圖2所示,探針關鍵制備流程:(1)為了使硅基底與微電極陣列之間完全絕緣,熱氧化制備硅底絕緣層(圖2A);(2)利用第一塊掩膜版光刻顯影將圖形轉移到光刻膠上,在其上濺射Ti層后濺射Pt薄膜層,增強粘附性,再剝離光刻膠層與多余的Ti/Pt薄膜層,留下記錄位點、導線和焊盤的金屬導電層圖形,以形成金屬導電層(圖2B);(3)采用等離子化學氣相沉積(PECVD)方法沉積氮化硅(Si3N4)絕緣層,利用第二塊掩膜版進行光刻顯影,對氮化硅進行等離子刻蝕,暴露出電極及焊盤,保留引線表面覆蓋的絕緣層,以形成氮化硅絕緣層(圖2C);(4)利用第三塊掩膜版進行光刻顯影,通過深刻蝕形成硅針基底外形;通過濕法腐蝕去除SOI底層硅,使硅針以外的二氧化硅薄層下脫落,形成微電極陣列針體(圖2D)。電極針體通過壓焊工藝與尾端接口電路進行焊接封裝,形成完整的微電極陣列芯片。MEMS傳感探針整體,后端正方形焊盤通過壓焊連接到外部接口電路,與斬波放大接口電路進行匹配集成(圖3A為傳感探針的后端尾端焊盤),而尖端則修飾納米材料酶敏感膜為傳感探針的尖端檢測位點部分(圖3B為2個同樣的Pt鉑探針),以形成特異選擇性的生物識別點。該MEMS探針芯片在硅針基底上集成了電化學微電極陣列、電生理微電極陣列、引線、焊盤以及氮化硅絕緣層。其中,硅探針1(以棱形分布著通道1,2,3和4,為電生理信號檢測通道)淀積鉑黑納米材料,用于電生理信號檢測;而硅探針2(以棱形排部著通道1,2,3和4,為電化學信號檢測通道)則修飾PtmPDGluOx固定敏感復膜,用于神經化學遞質信號檢測。電生理和電化學位點距離盡量近,便于檢測微米范圍內同一腦區微h境的電生理/電化學信息。為了防止互相干擾,電極之間距離不能太近。探針前端可植入部分長8mm,探針體寬90μm,相鄰探針1與2的間隔是180μm,4個圓形檢測位點為一組,分布在每個硅探針尖端,圓形位點直徑12μm,形成具有高時空分辨率、生理與化學遞質信息互不干擾的微米級檢測精度的神經信息檢測雙探針。
2.2神經電生理檢測位點鉑納米顆粒
為了提高微弱神經信號的檢測靈敏度,在MEMS探針表面修飾納米材料,其納米結構能夠有效增大比表面積[8],以加快表面的電子轉運,提高電流響應靈敏度。電化學鉑沉積使用陰極沉積機制,在基體電極上直接外延生長納米鉑顆粒層,鉑黑的電沉積鍍液使用H2PtCl4,再加少量硝酸鉛、醋酸鉛,鉛離子均勻化鉑鍍層晶粒,同時減少析出的氫的數量,提高了沉積電流效率。通過改變沉積電壓及時間,可以形成多種不同形貌的電極表面。沉積電位電位過小不會發生氧化還原反應,電位過大則會引起顆粒簇集問題;沉積時間會影響鉑黑層的致密均勻性與厚度,沉積具體操作為:將45mmol/L氯鉑酸和4.0mmol/L醋酸鉛溶液按體積比1〖KG-3∶〖KG-51配制成電解液,取15mL備用。實驗采用兩電極體系,將需要電鍍的4個位點與電化學工作站工作電極相連,電生理檢測的鉑絲電極與工作站的對電極(與參比電極短接)相連。將鉑絲電極和電極尖端浸入電解液中,在
.1V恒電位下沉積1min,電鍍結束后,用去離子水洗掉電極表面的殘留離子,即得到疏松的鉑黑顆粒薄層。在1kHz處,對修飾后的微電極表面進行電化學阻抗掃描,修飾后的電極阻抗約為34.0kΩ,比未修飾納米材料的裸電極阻抗下降了一個數量級。圖4A為探針修飾鉑黑納米后的表面掃描電子顯微鏡(Scanningelectronmicroscope,SEM)照片,圖4B為化學遞質探針尖端表面的鉑黑形貌,顯示出明顯的黑色顆粒層。
2.3電化學檢測位點選擇性酶膜修飾
制備的MEMS鉑探針電極表面固定的谷氨酸氧化酶(LGlutamateoxidase,GluOx)可氧化為谷氨酸,生成氨、H2O2和α酮戊二酸,通過間接測量H2O2發生氧化還原反應的產生電流,再進行電流與谷氨酸濃度的換算,即可得到谷氨酸濃度變化曲線。如圖5所示,本研究使用交聯法酶固定技術,并加入牛血清蛋白BSA惰性蛋白質作為基質,以防止酶分子交聯過程中因密度過大可能導致酶活性中心不能接近底物問題。
在谷氨酸檢測位點上固定PtmPDGluOx復膜結構,其中沉積的間苯二胺(1,3Phenylenediamine,mPD)層可與酶層形成有效大分子過濾抗干擾層,阻止尺寸比較大的分子(抗壞血酸AA、多巴胺DA、3/4二羥基苯乙酸DOPAC)通過,而小分子(H2O2等)則可以穿過,膜層接觸電極表面發生反應,生成牢固的復膜結構,即形成有效的谷氨酸神經化學遞質識別位點。修飾好的電極在室溫固化后,形成的酶層穩固性極佳,用水進行沖洗不會脫落。通過對3個電化學位點進行谷氨酸標準溶液標定,在PBS緩沖液中,+0.7V電位作用下,神經化學遞質檢測電極mPDGluOx微電極對6~35μmol/L不同濃度谷氨酸進行標定,結果顯示線性度為0.98,單位面積靈敏度為0.0069pA/μmol,電流響應誤差低于3.0pA,線性相關系數(R)為0.97;如圖6A所示,mPDGluOx微電極響應電流隨谷氨酸濃度的增加而增大;如圖6B所示,谷氨酸在電極表面氧化電流與濃度呈線性關系,靈敏度為24.6pA/(μmol/L)。證明設計的電化學檢測探針可以實現特異性選擇功能。實驗結果表明,微電極位點一致性良好、電化學性能可靠,化學遞質檢測硅針2上以棱形分布著通道5,6,7和8,可用于化學遞質谷氨酸的檢測。
2.4MEMS傳感后端信號處理集成單芯片制備
如圖7所示,神經電生理傳感后端信號處理集成單芯片包括:帶寬/增益可調的低噪聲神經電(動作/局部場電位)微弱信號斬波穩定放大器、SARADC與ASK/FSK調制的射頻發射器。傳感后端的小信號放大器進行前端傳感器感知的微弱神經電生理信號的放大與直流失調/低頻閃爍噪聲的抑制,然后送到低功耗中速SARADC模塊進行模擬到數字信號的轉換,最終SARADC輸出的數字信號被數字編碼器模塊進行無線信道傳輸編碼并打包成幀,然后幀碼流對射頻電路物理層進行基于ISM(Industrialscientificmedical)2.4GHz波段的射頻上頻譜調制,最終經過天線輻射到遠處接收基站。芯片能耗進行了降低優化,以提高設備續航時間。本研究設計的傳感后端數模混合信號調理單芯片,具有神經電傳感后端處理的普適應用價值,構建了可穿戴場合應用的微型神經信號采集與無線傳輸設備。該模塊可以集成到生物智能檢測手持終端設備,以構建智慧神經電傳感檢測設備。
2.4.1神經電生理信號的斬波穩定放大使用調制/解調斬波去噪技術[9],開發了具有普適應用價值的神經電生理電壓信號斬波小信號放大電路。斬波穩定電路利用紋波抑制環路消除位于單級放大器輸出端的紋波電壓,以避免紋波電壓導致后續電路的飽和問題[10]。斬波電路使用正反饋環路技術以提高輸入阻抗,提高后端斬波放大器與傳感器的分壓比,并且負反饋環路用于穩定中頻增益。斬波放大器主體核后級聯的基于采樣/保持原理的部分用于消除由于非理想的MOS開關引起的毛刺噪聲,并且斬波放大系統的增益/帶寬可以用數字方式進行調整。斬波放大電路基于功耗節省效率提高的電流復用單級放大主體核,并且放大主體單級核增益足夠大,有利于抑制后續電路噪聲[11]。設計的斬波放大電路,配合雙模并行SOIMEMS神經信息檢測器件,進行了放大電路關鍵指標的測試:等效輸入噪聲電壓≤0.7μVrms(rootmeansquare)、數字可調增益范圍71~82dB(4200~11200倍)、功耗是8.0μW/單通道、共模抑制比>110dB、電源抑制比>100dB等。
2.4.2SARADC模/數轉換SARADC電路采用多級放大器級聯自動歸零去噪聲、鎖存去回踢噪聲、最高位MSB電容拆分、電容陣列失配消除等技術,研發了一款轉換速度適中的SARADC核,其關鍵參數是:等效量化位數(Effectivenumberofbits,ENOB)為12bits,當最大轉換速度為1Msps時,芯片功耗為1.2mW,最大轉換速度為1Msps,信噪比SNR為60.9dB、無雜散動態范圍(Spuriousnoisefreedynamicrange,SFDR)73.7dB。SARADC使用了深N阱工藝,并且SAR數字控制部分進行單獨隔離,防止數字抖動對模擬部分的干擾。最后,對流片后的ADC模塊進行測試。結果表明,SARADC可完成放大后模擬神經電壓的數字轉換。
2.4.3ASK/FSK調制的射頻發射利用直接上變頻的ASK/FSK調制的射頻電路結構,主要模塊包括基于鎖相環的頻率綜合器(Phaselockedloopfrequencysynthesizer,PLLFS)與E類的功率放大器(Etypepoweramplifier,PA)。設計的神經電可穿戴設備的感知節點需要布置在人體頭部表面,需要使用電池供電;考慮系統復雜度與硬件成本,低功耗、高速率、高集成度是射頻電路設計的目標。VCO(Voltagecontroloscillator)通過頻率控制字進行頻帶的選擇;此外,分頻字進行分頻器分頻比的控制。PAE的輸出功率通過功率控制字進行PAE輸出幅度的控制,具有頻譜純凈、易于集成、功耗低等特點。FSK調制通過關斷鎖相環內的開環VCO電容陣列,VCO的變容管電容隨著控制電壓改變而改變,進而改變輸出信號的頻率與相位。VCO通過增加電容陣列的數目來擴大VCO的調頻范圍,從而避免控制電壓控制變容器引起的非線性問題。
2.4.4集成后的傳感芯片系統、與商用設備&舊系統的對比本研究研發的神經電生理(動作/場電位)信號采集傳感后端IC芯片與前端神經電生理探針匹配后集成,具有很小的體積,可以構建微型可穿戴神經檢測設備[12]。與商用的Cerebus公司多通道神經電生理信號記錄系統進行比較,此多通道神經電檢測儀器對電生理信號檢測的準確度為95%。由于本電路模塊高度集成化,可用于構建神經信息可穿戴微型終端,并且芯片內部對數字邏輯部分進行基于單獨隔離環的保護,以及利用深N阱工藝,以降低電路內部噪聲。此傳感芯片系統體積大大減小,具有便攜可穿戴實際應用價值。
3實驗部分
3.1實驗動物、儀器與試劑
實驗動物:健康野生型小鼠;實驗試劑:0.9%生理鹽水(石家莊四藥公司),0.7%趵坦(國藥集團化學試劑有限公司);實驗儀器:腦立體定位儀,液壓微推進器,BSA124S型電子天平(德國賽多利斯公司);MWD20型超純水器(美誠公司,中國);數據分析軟件:OfflineSorter動作電位分類軟件(PlexonInC.美國)、NeuroExplorer神經信息分析軟件(NexTechnologies,美國)。
3.2實驗方法
對麻醉小鼠進行0.75%戊巴比妥鈉腹腔注射,去掉頭皮后在小鼠顱骨上開1.5mm×1.5mm窗口,并挑破電極進入處的硬神經膜。電極植入時通過大神經皮層進入海馬區域,水平定位是(ML:2.01mm,AP:2.04mm)。將微電極陣列垂直固定在微推進器上,通過液壓推進器以1.1μm/s的速度緩慢勻速推進微電極,分別到達3個植入深度后暫停120s,等待電流穩定后繼續勻速推進。整個實驗過程中電極尖端垂直行程為2.2mm,并停留記錄在4個不同深度處,包含皮層到海馬區不同深度的神經區結構。采用Ag|AgCl絲植入到小鼠神經皮層作為電化學參比電極(AP:2.0mm,ML:
2.01mm,DV:
.01mm)。MEA上的一個電化學位點連接Gamry電化學工作站,采用計時電流法檢測神經內化學遞質谷氨酸,施加恒電位+0.70V,采樣頻率為2Hz(采樣間隔為0.50s)。
4結果與討論
4.1皮層至海馬區谷氨酸濃度變化
本實驗電極覆蓋皮層到海馬區不同腦區深度的4個停留記錄位置如圖8所示。電極由皮層植入海馬區過程中,使用計時電流法實時記錄電流變化[13],并從立體定位儀上讀取植入深度Z(圖8)。
在植入初期,電極在皮層表面Z=0.20mm處停留足夠長時間(90s),直至電流穩定在約15.19pA。圖9A顯示400s內電極由皮層(Z=0.70mm)植入到海馬區(Z=1.80mm)過程中的電流變化,電極在每個標定深度處停留約40s,并在下降過程中保持勻速。植入過程中電流曲線出現兩個明顯的濃度臺階,說明谷氨酸在不同神經區分布的自然濃度差異。圖9B顯示4個不同深度神經區對應的谷氨酸濃度
變化趨勢。為了減小計時電流法中非法拉第電流的影響,取Z=0.20mm處最后10s的掃描電流均值為神經顱內‘0′谷氨酸濃度對應的基底電流,電極穩定在某一具體深度后,計算氧化電流均值與該基底電流的差值,通過標定曲線靈敏度換算為該深度神經區的谷氨酸濃度。深度1對應神經區位于視覺皮層,谷氨酸濃度分別為(35.50±0.03)μmol/L、(37.80±0.27)μmol/L。深度3對應神經區位于海馬CA1區,谷氨酸濃度分別為(84.50±0.31)μmol/L。深度4處的濃度谷值分別對應皮層與CA1區、CA1區與齒狀回交接處的神經區。
4.2皮層至海馬區電生理信號分析
利用OfflineSorter軟件聚類分析記錄到的神經動作電位(Spikes),得到單神經元的放電序列。圖10A顯示了神經皮層區和海馬區典型通道1和3記錄到的電生理信號。4個通道在皮層區記錄到5種典型Spike,第3通道同時檢測到兩種不同類型的動作電位;而4個通道在海馬區記錄到3種典型Spike,其中第4通道同時檢測到兩種不同的動作電位。記錄到的皮層區動作電位發放頻率均值為2.10~10.67spikes/s,遠大于海馬區動作電位發放頻率均值0.03~0.15spikes/s。目前,傳統微透析法檢測的海馬區谷氨酸濃度為110~200μmol/L,略高于此微探針電極測量結果。神經電生理實驗表明,該微電極上的多測量點可同時記錄神經元不同層次的場電位[14],并很好地記錄單個神經元的胞外神經動作Spike電位。微電極記錄的皮層動作電位波形種類、發放頻率均大于海馬區細胞發放水平,說明皮層細胞活躍性和通訊復雜度大于海馬區。對海馬區的神經電生理記錄中,現有文獻報道采用膜片鉗記錄到的海馬神經元自發放電主要分為5種類型,分別為不規則發放型、單波規則發放型、緊張發放型、陣發排放型及周期排放型[15],圖10B為通道1記錄到的同一種放電波形具有錐體細胞的簇狀放電特性。
5結論
針對在體神經信息檢測的實際需求,使用SOI襯底的MEMS技術制備了一種雙通道植入式神經信息檢測8通道微電極陣列芯片。此芯片在硅針基底上集成了鉑金電化學微電極、電生理微電極、焊盤與引線等。采用納米修飾、酶固定技術分別進行電生理位點、谷氨酸檢測位點定向修飾。鉑黑修飾后電生理檢測位點阻抗比裸電極下降了一個數量級;谷氨酸位點在標準谷氨酸溶液內的線性度與單位面積靈敏度、反應時間、選擇性均滿足要求。基于研發的微電極陣列芯片對皮層至海馬區的神經電生理與谷氨酸在體雙模檢測,實時測量到從皮層至海馬區的谷氨酸動態釋放和神經動作Spike發放,驗證了植入式微電極陣列可實現谷氨酸遞質、動作電位和場電位的并行在體檢測,可為皮層到海馬區神經通路的研究提供有效的MEMS植入神經傳感探針。此外,基于傳感后端處理芯片(斬波穩定神經電生理小信號放大、SARADC模數轉換、編碼器與射頻發射)構建了一款低噪聲低功耗的微型神經電生理信息可穿戴設備。
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AbstractA8channelneuralsignal′ssimultaneoustransducerdetectionmicrosystemwasdevelopedtoresearchtheneurallooplocatedatthebrainhippocampuszone.ThecomponentsofthesystemcontainedtheneuralprobemanufacturedwiththeMicroelectromechanicalsystems(MEMS)techniquebasedonsilicononinsulator(SOI)substrate,biologicallownoisechopperstabilizationamplifier,lownoiseandintermediatespeedSARADCconverter,reducedandlowpowerASK/FSKmodulationradiotransmitter.Themicrosystemwasapplicablewiththecharactersofsmallvolume,interferencesfree,neuralelectrophysiologyandneurotransmittersimultaneousdetection,highsensitivity,highlinearity,etc.Theelectroderesistancewasoptimizedto35.0kΩafterdepositingnanometerplatinumblackonthe4electrophysiologicalsitesonthePtelectrode.Withthemodificationenzymetechnique,nanomaterialenzymemembrane(PtmPDGluOx)wasdirectlyfixedontheglutamatedetectionlocusforselectivelydetectingspecialneuralneurotransmittermatter.Inaddition,theelectrochemistrymeasurementresultsindicatedthatthelinearrangeofglutamatewas6-35μmol/Lwithcorrelationcoefficientof0.97,thesensitivitywas0.0069pA/(μmol/L).Thecurrentresponseerrorwaslessthan3.0pA,whichshowedthattheneuralneedlesatisfieddifferentialselection.Also,thelogic/analogmixedsignal180nmApplicationspecificintegratedcircuit(ASIC)technique(SmicRF180nm1Poly6M)wasusedtomanufacturethetransducerbackenddisposingICchip,andthetestresultsprovidedsomekeyparameterssuchaschopperstabilizationamplifier(equivalentinputtingnoisevoltage≤0.7μVrms@1kHz,gainof71-82dB,CMRR/PSRR>100dB),SARADC(ENOBis12bits,powerconsumptionis1.2mWwhenmaxmiumconversionspeedis1Msps,signalnoiseratiois60.9dB,etc),andASK/FSKmodulationradiotransmitter(thePA′soutputtingpowerof4-5dBm,theradiationrangeof10meters).Themicroneuraltransducerintegratedsystemwasconvenientandwirelesswearablefortheresearchofbrainhippocampusregion.
KeywordsNeuralloop;Neuralimplantableneedle;Lownoiseandlowpowerintegrationsinglechip;Biologicalwearabledevice
1、中國一直以和諧為美,而真正的和諧是什么?就是在堅持不同聲音、不同觀點的前提下,對于他人的一種寬容,一種融入。其實這就是君子之道。
2、孔子說,“仁者不憂,智者不惑,勇者不懼”,內心的強大可以化解生命中很多很多遺憾。
3、現在中國文化需要上課的人,比需要下課的人多。
4、寓言也是對生活的一種詮釋,它告訴我們,生活中真正的快樂是心靈的快樂,它有時跟外在的物質生活不見得有緊密的聯系。孔子生活的時代,是一個物質極其貧匱的時代,在那個時代真正快樂的力量,也就來自心靈的富足,來自一種教養,來自對理想的憧憬,也來自同良朋益友間的切磋交流。
5、增強把握幸福的能力,正是學習的終極目的。
6、當一個不幸降臨了,最好的辦法就是讓它盡快過去,這樣你才會騰出更多的時間去做更有價值的事情,你才會活得更有效率,更有好心情。
7、安貧樂道,在現代人眼中頗有些不思進取的味道。在如此激烈的競爭面前,每個人都在努力發展著自己的事業,收入多少、職位高低,似乎成了一個人成功與否的標志。
8、勇敢是每臨大事從容不迫,找到自己的出路。
9、理想主義與現實主義就是我們的天和地。只有當天地之氣凝聚在一個人心中的時候,它才能夠如此的強大。
10、我們永遠也不要忘記天地給予我們的力量。什么叫天人合一?就是人在自然中的和諧。
11、童年的無知可愛,少年的無知可笑,青年的無知可憐,中年的無知可嘆,老年的無知可悲。
12、人允許一個陌生人的發跡,卻不能容忍一個身邊人的晉升。因為同一層次的人之間存在著對比、利益的沖突,而與陌生人不存在這方面的問題。
13、現代的婚姻是情感的產物,更是競爭的結晶。
14、敵人變成戰友多半是為了生存,戰友變成敵人多半是為了金錢。
15、有所得是低級快樂,有所求是高級快樂。
17、世界上1%的人是吃小虧而占大便宜,而99%的人是占小便宜吃大虧。大多數成功人士都源于那1%。
18、人如果靠吃飯活著,那飯不叫飯,叫飼料。
19、中國人學美國人容易,中國人學中國人難。
20、一個人幸運的前提,其實是他有能力改變自己。
21、人的成長要接受四個方面的教育:父母、老師、書籍,社會。有趣的是,后者似乎總是與前面三種背道而馳。
22、經營自己的長處,能使你人生增值;經營你的短處,能使你人生貶值。
23、生命猶如一片綠葉,隨著時間的流逝,慢慢變的枯黃,但他的葉脈還是那么清晰可見。
24、把事情變復雜很簡單,把事情變簡單很復雜。
25、如果是棵小草,即使在最好的企業里,你也長不成大樹。果真如此,不如歷經風雨,把自己培養成名貴花卉。
26、二十一世紀工作生存法則就是:建立個人品牌,把你的名字變成錢。
27、怕爹是孝順,怕老婆是愛情。
28、沒有不合格的學生,只有不合格的家長。
29、地球是運動的,一個人不會永遠處在倒霉的位置。
30、我們可以躲開大家,卻躲不開一只蒼蠅。生活中使我們不快樂的常是一些芝麻小事。
31、有一種人只做兩件事:你成功了,他妒嫉你;你失敗了,他笑話你。
32、笨男人+笨女人=結婚;笨男人+聰明女人=離婚;聰明男人+笨女人=婚外情;聰明男人+聰明女人=浪漫愛情。
33、任何一個傻瓜都會引誘一個姑娘;但是知道怎樣離開她只有成熟男人才能做到。
34、人有兩只眼睛,全是平行的,所以應當平等看人;人的兩只耳朵是分在兩邊的,所以不可偏聽一面之詞;人雖只有一顆心,然而有左右兩個心房,所以做事不但要為自己想,也要為別人想。
36、失言就是一不小心說了實話。
37、真誠并不意味著要指責別人的缺點,但意味著一定不恭維別人的缺點。
38、人的本性就是貪婪,但沒有貪婪社會就不會進步。
39、戀愛是想一個人的心,婚姻是拴一個人的心,愛情是吞一個人的心。
40、最好的進攻就是進攻自己。
41、人生的意義不在于拿一手好牌,而在于打好一手壞牌。
42、成功是一種觀念,致富是一種義務,快樂是一種權利。
43、競爭,其實就是一種友誼,在對手的幫助下提高你的聰明度,害怕競爭的人已經輸給了對手。
44、錢可以幫窮人解決問題,卻幫富人制造問題。
45、把愛情投資在一個人身上,冒險;把愛情投資在許多人身上,危險。
46、世界上只有想不通的人,沒有走不通的路。
47、真正的財富是一種思維方式,而不是一個月收入數字。
48、一個人想平庸,阻攔者很少;一個人想出眾,阻攔者很多。不少平庸者與周圍人關系融洽,不少出眾者與周圍人關系緊張。
49、婚后的男女莫不“喜出”“望外”。
50、三流的化妝是臉上的化妝;二流的化妝是精神的化妝;一流的化妝是生命的化妝。
51、“危機”兩個字,一個意味著危險,另外一個意味著機會,不要放棄任何一次努力。
52、是英雄表現出來,是人才體現出來,是蠢才顯現出來。
53、“總”要為愛人著想,“經”得起愛人嘮叨,“理”應對愛人謙讓,男人應當“總經理”。
54、三人行,必有我師,三劍客,必有一強,三角戀,必有一傷。
55、一個人的視力本有兩種功能:一個是向外去,無限寬廣地拓展世界;另一個是向內來,無限深刻地去發現內心。
56、該放下時且放下,你寬容別人,其實是給自己留下來一片海闊天空。
57、承認現實生活中的不足之處,并通過自己的努力去彌補這種不足。
58、從某種意義上說,一個人心中有什么,他看到的就是什么。
59、迷惑多是因為眼界不夠大,井底之蛙怎么能知道什么叫海闊天空呢?
60、懷著樂觀和積極的心態,把握好與人交往的分寸,讓自己成為一個使他人快樂的人,讓自己快樂的心成為陽光般的能源,去輻射他人,溫暖他人,讓家人朋友乃至于更廣闊的社會,從自己身上獲得一點欣慰的理由。
61、“神于天,圣于地”是中國人的人格理想:既有一片理想主義的天空,可以自由翱翔不妥協于現實世界上很多規則與障礙;(經典語錄 )又有腳踏實地的能力,能夠在這個大地上進行他行為的拓展。
62、中國哲學崇尚的是一種莊嚴、理性和溫柔敦厚之美。
63、真正的和諧決不僅僅是一個小區鄰里之間的和諧,也不僅僅是人與人之間的和諧,還包括大地上萬物和諧而快樂地共同成長;人對自然萬物,有一種敬畏,有一種順應,有一種默契。
64、物質意義上的幸福生活它僅僅是個指標,而真正從內心感到安定和對于政權的認可,則來自于信仰。
65、只有真正的賢者,才能不被物質生活所累,才能始終保持心境的那份恬淡和安寧。
66、越是競爭激烈,越是需要調整心態,并且調整與他人的關系。
67、關愛別人就是仁慈,了解別人就是智慧。
68、在這個世界上最重要的人就是眼下你需要幫助的人,最重要的事就是馬上去做,最重要的時間就是當下,一點不能拖延。
69、我們每一個人的一生中都難免有缺憾和不如意,也許我們無力改變這個事實,而我們可以改變的是看待這些事情的態度。用平和的態度來對待生活中的缺憾和苦難。
70、如果你因為錯過太陽而哭泣,那么你也將錯過星星。
71、仁者不憂,智者不惑,勇者不懼,內心的強大可以化解生命中的很多遺憾。
72、要做到內心的強大,一個前提是要看輕身外之物的得與失。
73、人最難認知的是自己的心。
74、只有自己的心清楚了,才能去善待他人。
75、不要因為世俗的標準而遠離了自己的赤子之心。
76、在我們成長中一定有某種潛能從沒有被開發出來。
77、心齋(審視內心、反躬自省)是認識自己、獲得人生效率的好方法。
78、外在世界有多大,內心的深度就有多深。