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摘要：醫學論文中病理圖片的諸要素，包括標注放大倍數或添加標尺，以反映標本的放大倍數，幫助讀者了解標本的實際大小。筆者就病理圖片是否需要標注放大倍數，如何正確標注放大倍數及添加標尺，進行具體講解，旨在幫助作者和期刊編輯了解病理圖片放大倍數的計算方法，并且應最終轉換成標尺為宜。

關鍵詞：病理圖片；顯微照片圖；醫學期刊；放大倍數；標尺

一、引言

病理圖片是醫學論文的重要組成部分之一，具有直觀性、增強表達力的特點，使文章內容便于閱讀及理解。病理圖片的形式主要包括大體標本病理圖片、光鏡下組織病理圖片及電鏡下超微病理圖片[1]。內容正確、質量高，并且符合規范、涵蓋圖片各要素的病理圖片，可以提升論文的質量和說服力。病理圖片各要素除了最重要的圖片內容外，還包括圖片清晰度、圖序、圖題、圖注、圖例、放大倍數、染色方法，以及格式、排版等。部分期刊編輯部對病理圖片的編輯，雖然一直兼顧前述各要素的加工、處理，但對于圖片放大倍數的標注，則未進行強制性要求；而對于病理圖片添加標尺（scale-bar），則未予關注。近年來，中華醫學會系列雜志的審讀及編輯業務培訓內容，反復強調病理圖片需要標注放大倍數或添加標尺。現就病理圖片標注放大倍數存在的爭議，以及如何正確標注放大倍數及添加標尺等，進行全面、細致闡述。

二、病理圖片標注放大倍數的爭議

按照科技期刊編排相關國家標準，照片圖上應該標明表示目的物的標尺或放大倍數[2]。林清華等[3]認為，標尺作為照片圖的細節部分，應被重視。姚雪等[4]認為，明確顯微照片圖的放大倍數很重要，若無放大倍數的說明，讀者很難將圖片與實際物體的大小相聯系。王小仲與張乃光[5]認為，科研論文中的顯微照片一般應標明放大倍數。宋來鳳[6]認為，全面認識一病理形態事件，除了知道它的幾何形狀，尤其對肉眼看不到的實物，在看到它的影像照片時，還要知道它的實際大小，這需要通過其放大倍數來進行推斷。但是，2002年，吳波與周曉軍[7]對國外23種病理學及醫學雜志，以及數十種具有權威性的病理學參考書，同時還包括一些國內雜志的調查結果顯示，1994年前絕大多數雜志的顯微鏡及電鏡照片標注了放大倍數；而1994年以后，大部分雜志開始減少，甚至取消照片放大倍數的標注。該文作者認為，對顯微照片放大倍數標注的實際意義不大，其原因為觀察顯微鏡組織病理照片時，重點在于觀察組織結構、細胞形態、組織化學或免疫組織化學染色是否陽性；或者這類照片存在自身參照物，如紅細胞、淋巴細胞、正常的組織結構等。人民衛生出版社出版的《病理學》（9版）中的顯微鏡病理圖片部分未標注放大倍數，或無標尺；部分大體標本無隨照片同時拍攝的刻度尺[8]。由此可見，對于病理圖片是否標注放大倍數，尚存在爭議。

三、正確標注病理圖片的放大倍數

（一）光鏡下組織病理圖片放大倍數標注作者投稿時最常采用的方式，亦是編輯既往認可的方式，即采用顯微鏡的目鏡和物鏡放大倍數的乘積，表示光鏡下病理圖片放大倍數，若采用目鏡10×和物鏡40×觀察標本，則作者及期刊編輯標注該圖片的放大倍數為400×（或400倍）。需注意的是，“×400”不是400倍的正確表達方式，此時的“×”代表乘積；顯微鏡目鏡或物鏡的外殼處，均以10×、40×表示其放大10倍、40倍。目前，非常明確的是，既往以目鏡和物鏡放大倍數的乘積表示光鏡下病理圖片放大倍數的標注方式是錯誤的，應該摒棄。其原因在于，這種標注方式采用的目鏡，是觀察標本時的觀察目鏡，得到的放大倍數，是肉眼觀察到的、大腦視覺成像的放大倍數，是標本的觀察放大倍數，并不是顯微鏡拍攝的底片上圖像的放大倍數。醫學期刊論文中光鏡下組織病理圖片的總放大倍數，與顯微鏡底片上的圖像放大倍數、放大（或擴印）照片的放大倍數、期刊縮放制版的放大倍數有關[9]。首先，顯微鏡底片上的圖像放大倍數=物鏡放大倍數×攝影目鏡放大倍數×攝影裝置放大系數[9]。其中，攝影目鏡區別于觀察目鏡，是裝于照相機下面的光柱內，在外面觀察不到，在使用攝影設備時，需確定設備內攝影目鏡的倍數，以便后期計算放大倍數[10]；攝影裝置放大系數，根據不同型號攝影裝置及不同類型攝影目鏡而不同，可以查詢攝影裝置的說明書得到該系數，例如，使用日本產OlympusPM-10AD型攝影裝置及NFK型攝影目鏡的放大系數為1，若物鏡為10×，攝影目鏡為3.3×，則底片上圖像放大倍數為10×3.3×1=33倍。其次，若用顯微攝影拍攝的底片，放大（或擴印）成照片進行制版，則放大（或擴印）照片的放大倍數=放大后照片的長邊（mm）/底片長邊（mm）[9]。其中，若放大成5寸照片，其長邊約為127mm，顯微攝影通常采用135底片，其大小為36mm×24mm，因此135底片長邊為36mm，故將135底片上圖像擴印成5寸照片，其放大倍數為127mm/36mm≈3.53倍。此處需要注意的是，雖然135底片長邊是36mm，擴印時底片四周被底片框壓邊，投射到照片上的圖像實際長邊＜34mm[10]。對此，可在放大（或擴印）后的照片上，選擇任一邊界清晰的結構，測量2點間直線距離，再于底片上測量相應2點間直線距離，這2個直線距離的比值（前者與后者的比值），即為放大（或擴印）照片的放大倍數[6]。最后，采用原始底片，或者放大（或擴印）照片進行制版時，根據版面美觀、版面大小以及期刊體例一致等要求，會對底片或者放大（或擴印）照片進行縮放，病理圖片的放大倍數隨之改變，編輯應根據縮放比例進行校正，計算出正確的總放大倍數予以最終標注。同時，在縮放圖片時，應注意按照原圖片的長寬比進行等比例縮放，才能不改變圖片形狀，獲得正確的放大倍數。期刊縮放制版的放大倍數=制版后照片的長邊（mm）/用于制版的照片（或底片）長邊（mm）。綜上所述，光鏡下組織病理圖片的總放大倍數=顯微鏡底片上的圖像放大倍數×放大（或擴印）照片的放大倍數×期刊縮放制版的放大倍數[9]。筆者對此進行簡化，即明確顯微鏡底片上的圖像放大倍數、采用的底片（如135底片）、用于制版的圖片后，則制版后圖片最終放大倍數=顯微鏡底片上的圖像放大倍數×（用于制版的照片長邊/底片長邊）。

（二）大體標本病理圖片及電鏡下超微病理圖片放大倍數標注對于大體標本的放大倍數標注，最佳方法是在大體標本下方或重要結構旁邊放置標尺（米尺或專用刻度尺），將大體標本連同標尺一起拍攝；目前的電鏡，一般都可在拍攝時自動添加標尺[7]。這2種情況，由于標尺已整合在圖片中，可隨圖片的縮放等比例縮放，故一般不采用放大倍數進行標注。

四、病理圖片添加標尺的方法

對于病理圖片添加標尺，目前期刊界已達成共識。由于標尺可以隨圖片等比例縮放；而且，與標注放大倍數相比，為圖片添加標尺省去復雜的計算，還能得到真實的放大倍數[4]。因此，原始數碼照片圖中本身帶有標尺，或者后期為照片圖制作標尺，是反映標本大小的最精確方法。原始數碼照片圖中本身帶有標尺，可見于如下情況：和標尺一起拍攝的大體標本照片；拍攝時自動添加標尺的電鏡照片；目前一些較高檔顯微鏡，其照相設備上已設置可添加標尺的功能，使用者可以選擇在拍攝時添加標尺。但是，目前仍有很多顯微鏡設備無添加標尺的功能，或者添加標尺的選項并不符合使用者的要求。王羿婷等［11］拍攝完一張病理圖片后，不調整顯微鏡各項參數，立即采用帶有微距刻度尺的載玻片再拍攝一張照片，照片內容僅為該微距刻度尺。這兩張照片拍攝條件基本一致，因此照片內的微距刻度尺可作為該病理圖片的基礎刻度尺；然后，作者采用Photoshop軟件，添加所需長度的標尺，其標尺具體制作步驟見參考文獻[11]。筆者認為，該方法的原理正確，簡單、可行，非常值得其他作者借鑒。另外，期刊編輯為病理圖片制作標尺的前提是，需要作者提供顯微鏡底片上圖像的正確放大倍數。若作者提供的圖片放大倍數是100×、200×、400×，很大可能不正確，因為攝影目鏡通常為2.5×、3.3×、5.0×、6.7×，故不易得出上述放大倍數[9]。確定用于制版的圖片大小不再改動后，采用前述方法，編輯可計算出制版后病理圖片的最終放大倍數。根據此放大倍數（若設為A，通常修約成整數），若要制作1個B長度的標尺，則用于制版的病理圖片中標尺長度（mm）=A×B(μm)/1000。例如，制版圖片中，標本的最終放大倍數為100×，若需制作1個底片中代表50μm的標尺，在制版圖片中的標尺長度（mm）=100×50μm/1000=5mm，即編輯使用Photoshop等軟件，制作1條5mm長度的標尺，并對其標注為50μm，置于用于制版的病理圖片右下角（也可為其他合適位置）即可。

五、醫學期刊編輯對光鏡下病理圖片放大倍數或標尺的編輯加工

本刊作者投稿的光鏡下病理圖片，部分未標注放大倍數，較多作者標注為100×、400×，幾乎無作者提供添加標尺的病理圖片。因此，根據上述標注放大倍數和添加標尺的方法,醫學期刊編輯在編輯加工病理圖片時，可以采取如下措施：首先，判斷“100×、400×”極可能是作者對標本的觀察放大倍數，而不是顯微攝影底片上圖像的放大倍數，故不應采納。其次，可與作者溝通，詢問作者拍攝病理圖片時的攝影裝置型號、攝影目鏡型號及倍數，閱讀該裝置的說明書，查詢放大系數，采用的底片是否為135底片或測量所采用底片的長邊，這樣編輯可以幫助作者計算出底片上圖像的放大倍數；也可在投稿的圖片上找到清晰的2點，請作者在底片上測量相應2點間直線長度，編輯即可計算出作者投稿圖片的放大倍數，并在后期制作時盡量采取對病理圖片添加標尺的方法。最后，若作者不能提供前述顯微鏡攝影信息，則標注低倍、中倍、高倍放大，分別相當于作者觀察放大倍數的40×、100×或200×、400×[12]。

六、規范化標注病理圖片放大倍數及添加標尺

吳波和周曉軍[7]分析了不用標注放大倍數的原因，建議針對描述形態學變化的顯微照片,尤其是免疫組織化學染色、組織細胞化學染色等特殊染色的照片，取消其放大倍數的標注。一些醫學期刊及《病理學》教材對光鏡下病理圖片采用標注低倍、中倍、高倍放大的方式[12-13]。筆者認為，在作者不能提供圖片的正確放大倍數及隨圖添加標尺的情況下，這些方法可能為一種權宜之策。由于病理圖片添加標尺可以準確反映標本的放大倍數，并且國外期刊對顯微照片圖添加標尺亦有相關要求，甚至包括標尺線的寬度[4,14]。因此，在掌握前述方法后，期刊編輯應盡量將病理圖片的放大倍數，轉換成標尺，置于圖片中，以達到病理圖片統一化、規范化、國際化的目的。導致作者不能提供病理圖片的正確放大倍數或隨圖添加標尺的原因，一是作者不知道標注放大倍數或添加標尺，是病理圖片應該具備的要素；二是錯誤地將標本的觀察放大倍數當成底片上圖像的放大倍數；三是不知如何正確標注放大倍數或添加標尺。由于一些《病理學》教材對其中病理圖片的放大倍數標注多不完整，很少或不添加標尺，醫學生不能從最初的學習中，認識到病理圖片應該標注放大倍數或者添加標尺，并且形成習慣，但他們卻能自然想到一些血清指標檢測結果，必須有單位。因此，老師對醫學生授課時，臨床科研工作者探討論文寫作時，期刊編輯與作者溝通時，均應強調病理圖片需要標注放大倍數或添加標尺，而且以添加標尺為宜。臨床科研工作者在拍攝病理圖片之初，就應當采取措施添加標尺，或者記錄顯微攝影裝置的相關參數以備后期計算放大倍數，否則拍攝完成后很難彌補。

七、結語

臨床科研工作者、論文作者及醫學期刊編輯均可參考前述方法，掌握正確標注病理圖片放大倍數及添加標尺的方法。只有作者投稿時提供的圖片放大倍數是正確的，編輯才能最終規范化制作成標尺。而且，期刊編輯學習和熟練掌握這些方法，才能幫助作者糾正錯誤表示方法，并且通過詢問作者的添加步驟，辨別作者補充的放大倍數或標尺是否正確。如果作者提供的信息不完善、不正確，則應實事求是放棄標注，不應為了病理圖片要素的完整性而標注錯誤信息。

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[13]陳平圣,馮振卿,劉慧.病理學[M].2版.南京:東南大學出版社,2017:14-18.

作者：程開健 江雨蓮 徐偉娟 單位：四川大學華西第二醫院